Hepatiitti C: n PCR: n laadullinen ja kvantitatiivinen analyysi: negatiivinen, positiivinen, dekoodaus

Share Tweet Pin it

Hepatiitti C - viruksen aiheuttama maksasairaus HCV Flavivirus (alkaen Englanti hepatiitti C-virus.), Jossa rakenne sisältää molekyylin ribonukleiinihappo (RNA). RNA kantaa viruksen geneettisen koodin. Sen läsnäolo mahdollistaa hepatiitti C: n PCR-analyysin.

HCV on vaaraksi ihmisille ja että ns serologista ikkuna (välinen aika infektio ja ulkonäkö reaktion immuunijärjestelmä) voi olla riittävän pitkä - muutamasta viikosta kuuteen kuukauteen.

Tämä ei paljasta infektiota ja aloittaa hoidon ajoissa.

Vastaanottavan kehon yksilöllisistä ominaisuuksista riippuen HCV voi ilmetä akuutissa muodossa ja saattaa myös kehittyä kroonisena sairaudena, joka vaatii pitkäaikaista ja kallista hoitoa. HCV-vasta-aineiden havaitsemiseksi suoritetaan joukko laboratoriokokeita, mukaan lukien hepatiitti C: n PCR. Tämä testi suoritetaan kaikille ihmisille, joiden veressä HCV-vasta-aineet löydettiin.

Mikä on PCR-analyysi?

Laboratorioanalyysi hepatiitti C: n PCR: lle - biologisen materiaalin tutkimus flavaviruksen läsnäolon tunnistamiseksi.

Polymeraasiketjureaktion (niin puretaan lyhenne) esittää kvantitatiivinen arvo virus- leesion organismi, sen laatuominaisuuksien sekä genotyypin sisältävät RNA: ta.

Niiden perusteella sekä lisäanalyysien perusteella määritetään hoitomenetelmä ja kesto sekä epidemiologinen tekijä (riski siirtää toiselle liikenteenharjoittajalle).

Mikä on hepatiitti C: n RNA-analyysi?

Hepatiitti C: n PCR: ta kutsutaan myös RNA-analyysiksi (HCV RNA), koska sitä ei tiedetä. Flavavirus sisältää RNA-partikkelin, jonka virion koko on 30-60 nm. Yksi tämän mikro-organismin ominaisuuksista on suuri mutaatioalttius.

Jokaisella viruksen alalajilla (genotyypeillä) on erilainen vastustuskyky, joka aiheuttaa erilaiset hoitomenetelmät ja potilaan jatkoennusteen luonteen.

Biologisen materiaalin (laskimoverta) käsitellään paasto ja yleensä testattu Real-Time PCR (erittäin herkkä reaaliaikainen diagnostiikka määrittää alaraja 15 IU / ml käyttämällä automaattista suljetun järjestelmän tila).

Muita testejä on esimerkiksi COBAS AMPLICOR, jonka herkkyys on 50-100 IU / ml. Kaikissa laboratoriotutkimuksissa herkkyyskynnys on tärkeä, ts. reagenssin kyky havaita viruksen minimikonsentraatio biologisessa materiaalissa.

Analyysityypit hepatiitti C: lle käyttäen PCR-menetelmää

Hepatiitti C: n PCR sisältää kolme tärkeää osaa:

  • laadullinen analyysi;
  • kvantitatiivinen analyysi;
  • genotyypitys.

Nämä testit voivat määrittää viremian luonteen sekä taudinaiheuttajan geneettiset oireet. Diagnostiikkajärjestelmän herkkyydestä riippuen testi suoritetaan kerran, ja joskus toista testiä herkemmällä reagenssilla tehdään tulosten vahvistamiseksi tai tarkentamiseksi.

Korkealaatuinen hepatiitti C PCR

PCR-analyysi hepatiitti C: n laadulle on toinen yleinen nimi polymeraasiketjureaktiomääritykselle. Testin standardi herkkyys, joka mahdollistaa viruksen vaurion läsnäolon, on välillä 10-500 IU / ml.

Hepatiitti C: n PCR: n negatiivinen analyysi osoittaa, että viruksen pitoisuus potilaan veressä on pienempi kuin diagnoosijärjestelmän herkkyys.

Jos kvalitatiivinen PCR antoi "ei havaittu" vastausta, myöhempää hoitoa varten on tärkeää tietää reagenssin herkkyysraja.

Proteiinifraktiot flavavirukseen vaikuttavat paljon myöhemmin.

Quantitative Hepatitis C PCR

PCR-hepatiitti C: n kvantitatiivinen on viruksen kuormituksen indikaattori, joka heijastaa flavaviruksen RNA-pitoisuuden tasoa kehossa. Tämä on indikaattori, joka osoittaa, kuinka monta viruksen RNA-fragmenttia on yksi kuutiosenttimetri verta. PCR-hepatiitti C-RNA: n kvantitatiivinen testitulokset tavanomaisessa järjestelmässä on ilmoitettu kansainvälisinä yksikköinä ml: aa kohti (IU / ml) ja voidaan tallentaa eri tavoin, esimerkiksi - 1,7 ppm tai 1700000 IU / ml.

Hepatiitti C: n kvantitatiivinen PCR-diagnoosi annetaan potilaille ennen antiviraalisen hoidon aloittamista ja hoidon viikolla 12 HCV: n valittujen menetelmien tulosten arvioimiseksi. Viruslaskun avulla voit tunnistaa kolme taudin tärkeätä indikaattoria:

  • infektiivisyys, so. riski lähetyksen väliaineesta toiseen (korkeampi pitoisuus flavavirusa RNA, sitä todennäköisemmin tartuttaa toiselle henkilölle, esim., yhdynnän aikana);
  • hoitomenetelmä ja tehokkuus;
  • kestosta ja ennusteesta (mitä korkeampi viruskuorma, sitä kauemmin hoito kestää).

Hepatiitti C: n kvantitatiivinen PCR-diagnoosi riippuu laboratoriotestityypistä ja sen herkkyydestä. Normin alarajan katsotaan yleensä olevan 600 000 IU / ml, keskimääräinen arvo on välillä 600.000-700.000 IU / ml. Tuloksia 800 000 IU / ml tai enemmän pidetään RNA: ta sisältävien virusten suurina määrinä.

genotyypitys

Koska HCV: n korkea mutaatioaktiivisuus on luonteeltaan tärkeää, on määritettävä testausvaiheessa, minkä viruksen genotyyppi on potilaan veressä. Yhteensä 11 hepatiitti C -viruksen genotyyppiä on kirjattu planeetalle, johon kuuluu monia alalajia. Venäjän federaation alueella 1,2 ja 3 ovat yleisiä.

Hepatiitti C: n PCR-RNA yhdessä genotyyppien kanssa on erittäin tärkeä analyysin osa, koska antaa lääkärille mahdollisuuden määrittää viruksen vastustuskyky (resistenssi), valita sopivia lääkkeitä ja määrätä hoidon.

Genotyyppaus mahdollistaa myös epäsuoran määrityksen maksan tilasta. Esimerkiksi HCV: n 3 genotyyppiin liittyy usein steatosis, jossa rasva kerääntyy kehon soluihin.

PCR: n veritesti hepatiitti C: ssä tulee antaa luku, joka määrittää genotyypin. Laboratorion vastauksissa se voidaan kirjoittaa "ei kirjoitettu" - ja tämä tarkoittaa, että ihmisveressä on virus, jota testausjärjestelmä ei määrää. Tämä voi osoittaa, että genotyyppi ei ole tyypillistä tietylle maantieteelliselle alueelle. Tässä tapauksessa on välttämätöntä siirtää analyysi uudelleen diagnoosijärjestelmän suuremmalle herkkyydelle.

PCR-analyysin dekoodaus hepatiitti C: lle

Hepatiitti C: n PCR: n testi voidaan ilmaista edellä mainittujen tietojen perusteella. Laboratoriotestien tulosten vastaanotossa yleensä kirjoitetaan seuraavat tiedot:

  • "Löydetty" / "ei löytynyt" (korkealaatuinen PCR hepatiitti C: lle);
  • RNA: ta sisältävien fraktioiden määrä, esimerkiksi 831,680 IU / ml (kvantitatiivinen PCR-määritys);
  • luku, joka määrittää HCV-genotyypin, esimerkiksi - 1, 2, 3, 4;
  • testin nimi on useimmiten reaaliaikaista.

Tärkein hepatiitti C: n PCR-analyysin tulkitsemiseksi on toinen kohde, joka osoittaa viruksen kuormituksen määrittävän ennusteen, hoidon menetelmän ja keston.

Jos hepatiitti C: n PCR-analyysi on negatiivinen ja ELISA-positiivinen - mitä se tarkoittaa?

Laboratoriotutkimusten tulkitsemiseksi on tärkeää ottaa yhteyttä hepato- tai infektiosairauden asiantuntijaan, joka selittää saadut tiedot diagnostisen järjestelmän tyypin ja sen herkkyyden kynnyksen mukaisesti. Lääketieteellisessä käytössä on monia verikokeita, jotka voivat johtaa henkilöä, jolla ei ole lääketieteellistä koulutusta, sekaannusta.

Esimerkiksi, jos testi HCV PCR-negatiivinen ja positiivinen ELISA, se voi osoittaa, että tällä kertaa potilaan veressä ei ole HCV, mutta ennen kuin hän sai akuutin muodossa hepatiitti C: Katsotaan, että positiivinen immunosorbenttimääritys (ELISA), ilmenee, että veressä on vasta-aineita, jotka on tuotettu viruksen hyökkäyksen jälkeen aiemmin. Nykyaikaisessa lääketieteellisessä käytännössä ELISA-analyysi ei kuitenkaan ole riittävän luotettava ja usein antaa epätyypillisiä tuloksia, joten lääkärit käyttävät sitä ensisijaisena seulonnanaan. Taudin diagnosoinnin yhteydessä asiantuntijat ohjataan tarkasti PCR-testeillä.

Hyödyllinen video

Seuraavassa videossa on hyvin yksityiskohtaista ja mielenkiintoista kertoa, mitä PCR-menetelmän ydin on, miten analyysi tehdään:

johtopäätös

Laskimoverta otetaan tavallisesti hepatiitti C: n PCR: n analyysiin. Useimmiten biologinen materiaali - ELISA: ta ja suoraan PCR-testiä varten on kaksinkertainen näytteenotto. Oikeat testitulokset edellyttävät biologisten materiaalien laboratoriotutkimuksen tärkeimpien sääntöjen noudattamista:

  • veri analysoitavaksi annetaan aamulla tyhjälle vatsalle;
  • syömisen ja veren ottamisen tulisi kestää vähintään 8 tuntia;
  • Ennen testin suorittamista sinun on myös suljettava pois alkoholia ja paistettuja ruokia;
  • Päivää ennen verta, sinun on vältettävä suurta fyysistä rasitusta.

Verikokeiden tulokset ovat yleensä valmiita seuraavana päivänä.

Hepatiitti C -viruksen diagnoosi

Hepatiitti C -virus (HCV) on Flaviviridae-perheestä peräisin oleva RNA: ta sisältävä virus. Tämä infektio kykenee lisääntymään verisoluissa (monosyytit, neutrofiilit, B-lymfosyytit ja makrofagit) ja vahingoittaa itse maksasoluja - hepatosyyttejä. Koska mutaatioaktiviteetti on korkea, tämän tyyppinen hepatiitti kykenee välttämään ihmisen immuunijärjestelmän vaikutusta.

On olemassa 11 genotyyppiä ja tällaisen viruksen alatyyppien massa, jotka eroavat maksavaurion suuruudessa ja vaikuttavat hepatiittihoidon ajankohtaan. Tällainen eri hepatiitti C edellyttää erilaisia ​​antiviraalisen hoidon menetelmiä. Esimerkiksi ensimmäisen ja neljännen genotyypin hepatiittiä tulisi hoitaa 48 viikkoa, ja toisen ja kolmannen lajin virusten hoidossa saattaa kestää vain 24 viikkoa.

Kun hepatiitti C: n nopea testi antoi positiivisen tuloksen, suoritetaan PCR-analyysi viruksen RNA: n tunnistamiseksi verinäytteistä.

PCR-diagnostiikka

Polymeraasiketjureaktio (PCR) on kokeellinen menetelmä virusten havaitsemiseksi. Tällainen hepatiitti C: n analyysi mahdollistaa DNA: n tai RNA-viruksen joidenkin fragmenttien pitoisuuden merkittävän lisääntymisen esitetyissä näytteissä. Tämä mahdollistaa niiden tunnistamisen ja jopa laskee numeron.

Tämä hepatiitti C-testi suoritetaan seuraavan menettelyn mukaisesti:

  1. Verinäyte (geneettinen aine), joka voi sisältää halutun hepatiittigeeniä, lisätään koeputkeen. Hänen paikalleen erikoismateriaaleja - alukkeita, ne ovat lyhyitä segmenttejä halutusta geenistä, jotka syntetisoidaan kemiallisesti. Tässä astiassa lisätään myös DNA- tai RNA-polymeraasia, se pystyy rakentamaan nukleiinihapon ketjuja, jotka ovat täysin identtisiä alkuperäisen kanssa. Saatuun koostumukseen lisätään joukko vapaita nukleotideja, jotka ovat erityinen rakennusmateriaali DNA: lle ja RNA: lle, joista yksi sisältää pieniä radioaktiivisen fosforin hiukkasia.
  2. Tuloksena oleva seos kuumennetaan ensin 95 astetta, minkä vuoksi normaalissa tilassa toisiinsa sekoittuvat molemmat DNA-helixit heikentyvät tämän vaikutuksen vuoksi.
  3. Jotta analyysi jatkuu, lääke jäähtyy, tässä vaiheessa alukkeet kiinnittyvät hepatiitti-viruksen genomiin haluttuun alueeseen, eivätkä anna DNA: n muodostamasta kaksinkertaiseen helixiin. Kun seos jäähtyy, polymeraasi hakee nukleotidien yksittäisiä säikeitä. Tämän entsyymin kiinnittymisen aikana se liukuu pitkin DNA-juostea (kuten lohko köydellä) ja kaksoiskierteellä se ei pysty "toimimaan", tätä tarkoitusta varten seosta kuumennetaan.
  4. Analyysin jatkamiseksi suoritetaan uudelleenlämmitys, joka johtaa jälleen nukleotidiketjujen erottamiseen. Kun tällaiset PCR-syklit suoritetaan näytteessä, etsittyjen hepatiittigeenien määrä kasvaa geometrisessa suhteessa ja jäljelle jäävät geneettiset materiaalit tuotetaan (muodostetaan) vain lineaariseksi säännöllisyydeksi.
  5. Tutkimuksen suorittamiseksi liuos puhdistetaan jäljellä olevista nukleotidihiukkasista. Ne erotetaan elektroforeesilla erottamalla molekyyliset DNA-ketjut molekyylipainon parametreilla. Tällaiset hepatiittitutkimukset PCR: n avulla mahdollistavat sen määrittämisen, ovatko halutut viruksen geenit läsnä näytteessä tai ei.

Tämän testin etu on PCR-reaktion erittäin suuri herkkyyskynnys. Tällainen tekniikka diagnostiikan suorittamiseksi, ihanteellisesti, vaatii vain yhden viruksen genomin koko näytteelle.

Lisäksi tällainen PCR on täysin spesifinen. Kummassakin geenissä on ainutlaatuinen nukleotidisekvenssi, joka sormenjälkien kaltaista ei voida toistaa missään. Tätä hepatiitti C -analyysiä varten alukkeet syntetisoidaan siten, että ne vastaavat täysin haluttujen geenien yksilöllisiä osia, joita mikään muu sekvenssi ei ole.

Tämä tekniikka mahdollistaa myös hepatiitin analysoimisen ja määrittämisen c: ssä, mikä auttaa määrittämään lopullisen diagnoosin.

Tällainen laboratoriotutkimus mahdollistaa tiedon hankkimisen enemmän kuin vain HCV-RNA: n läsnäolon tai puuttumisen tai muun verinäytteen tyypin. Radioaktiivisen säteilyn parametrin määrittelyssä on myös tilaisuus paljastaa, kuinka paljon haluttua geneettistä materiaalia alun perin havaittiin tutkittavalla näytteellä. Tämä antaa meille mahdollisuuden määrittää ns. Viruskuorman parametri - hepatiitti-RNA-hiukkasten pitoisuus tiettyyn tilavuuteen.

Laadullinen PCR-analyysi

Tämän analyysin avulla voidaan määrittää hepatiittiviruksen läsnäolo verinäytteissä. Se on tehtävä kaikille ihmisille, joilla on todettu olevan vasta-aineita hepatiitille.

Tällaisen tutkimuksen tuloksena voi olla vain kaksi arvoa:

  • "Löydetty". Tällainen positiivinen testitulos tulkitaan seuraavasti: hepatiitti-virus-RNA: n fragmentit löydettiin analysoidusta näytteestä biologisesta materiaalista. Tästä seuraa, että potilas sai infektiota tämän viruksen kanssa. Tämä voi viitata siihen, että hepatiitin aiheuttama tekijä kertoo kehossa ja infektoi uusia soluja tuhoamalla maksan.
  • "Ei havaittu". Tämä tulos osoittaa, että näytteen, joka on analysoitu laboratoriossa havaittiin fragmentteja, RNA: ta, joka on spesifinen hepatiitti C -viruksen On myös mahdollista, että pitoisuus RNA-virus-patogeeni näyte oli niin pieni, että testi ei pysty tunnistamaan. Tällaisissa tapauksissa sanotaan, että pitoisuus on alle määrityksen herkkyyskynnys.

Tällainen testi voi olla myös vääriä-positiivisia tai vääriä negatiivisia, johtuen biomateriaalin saastumisesta tai sellaisten erityisten aineiden näytteistä, jotka reagoivat analyysin kannalta välttämättömien kemiallisten komponenttien kanssa.

On korostettava, että hepatiitti C: n akuuteissa vaiheissa kvalitatiivinen PCR-menetelmällä tapahtuva tutkimus voi havaita sen RNA: n jälkeen vain 1-2 viikon kuluttua kehon infektion hetkestä. Tämä tarkoittaa, että tauti voidaan tunnistaa kauan ennen ulkoisten oireiden ilmenemistä tai vasta-aineiden esiintymistä hepatiitille elimistössä.

Verinäytteenotto (laskimosta) suoritetaan edullisesti tyhjälle vatsaan.

PCR: n kvantitatiivinen analyysi

Määritä tämän analyysin avulla hepatiittiviruksen pitoisuuden taso potilaaseen (viruskuorma). Tällainen testi on toimitettava viruksen RNA: n määrän arvioimiseksi tiettyyn tilavuuteen.

Tämän tekniikan avulla suoritettujen hepatiitti-c-testien analyysillä voi olla seuraavat tulokset:

  • Määrällinen indikaattori (kuvioina)

Viruksen pitoisuus (numero) on numeroitu. Tätä varten käytetään eri yksiköitä: joko ME / ml (kansainvälinen yksikkö millilitrassa) tai kopiot / ml (viruksen RNA-kopioiden määrä millilitroina). Keskimäärin 1 IU / ml vastaa 4 kopiota / ml, koska eri testausjärjestelmillä on eri muuntokertoimet tällaisille yksiköille.

Alhaisen viruskuorman katsotaan olevan alle 400 000 IU / ml tätä määritystä varten ja korkein 8000000 IU / ml.

Tämän kvantitatiivisen arvioinnin avulla voidaan määrittää potilaan taudin tarttuvuus ("tarttuvaisuus"). Mitä enemmän tämä analysointitunnus on, sitä suurempi riski, että taudinaiheuttaja siirtyy muille ihmisille (seksuaalisella kontaktilla tai pystysuoralla reitillä).

Tämä tuomio tarkoittaa sitä, että kvantitatiivinen menetelmä ei pystynyt havaitsemaan hepatiitti-RNA: ta, mutta virus itsessään on läsnä kehossa vain hyvin pienellä pitoisuudella. Tämä vahvistettiin tekemällä PCR: n täydentävä kvalitatiivinen analyysi ja positiivinen tulos osoittaa hepatiitin esiintymisen.

  • Tulos "Ei havaittu"

    Analyysin tämä positiivinen tulkinta viittaa siihen, että itse verituotoksessa oleva määrällinen testi ei voinut havaita hepatiitti C -viruksen erityisiä RNA-hiukkasia.

  • PCR: n kvantitatiivinen analyysi, joka suoritettiin eri antiviraalihoidon aikana (1., 4., 12. ja 24. viikko), antaa mahdollisuuden arvioida hoidon tehoa ja tehdä tarvittavat korjaukset.

    Analyysin erityisyys

    Tämä testi on esitettävä hepatiitti C: n eri genotyyppien määrittämiseksi. Nykyään tämän patogeenin 11 genotyyppiä tunnetaan ja monet alatyypit ovat. Ensimmäisen, toisen ja kolmannen lajin hepatiitti C: n genotyypit ovat tavallisia maassamme. Laboratorioissa voi havaita erilaisia ​​alatyyppejä näiden lajien: 1a, 1b, 2a, 2b tai 3, 4, 5, 6 genotyypit erilaisina muunnoksina alatyyppejä. Kaikilla näillä hepatiitilla havaitsemisen spesifisyys on 100%.

    Selvennys genotyypin muutoksesta mahdollistaa sopivan hoidon valitsemisen. Erityisen genotyypin läsnäolo potilas ei osoita, että tauti on helpompaa tai vaikeampaa, ne ovat vain hepatiittiviruksen lajikkeita eikä enää.

    Niissä tapauksissa, joissa laboratorio ei pysty eristämään viruksen genotyyppiä, voidaan antaa tulos: "Ei ole kirjoitettu. Genotyyppejä tutkittiin: sellaisia ​​ja sellaisia ​​(esimerkiksi 1a, 2b, 3av). Tämä transkripti osoittaa, että tässä laboratoriossa ei ollut vastaavia reagensseja, jotka voisivat määrittää hepatiittiviruksen genotyypin. Tutkimuksessa tehtiin luetteloon annettu virus, mutta niiden vastaavuutta RNA-näytteitä ei havaittu.

    Lopullisen diagnoosin tekemiseksi vain yksi analyysi on riittämätön. Kukin testeistä voi antaa vääriä positiivisia tuloksia. Monimutkainen tutkimus suoritetaan hepatiitin tarkan tyypin määrittämiseksi ja infektion asteelle kehon infektoimalla. Samanaikaisesti valmistetaan maksan biopsia ja sen entsyymien testaus: ALAT, ASAT sekä alkalinen fosfataasi ja LDH. Bilirubiinitestiä ja protrombiini-indeksianalyysiä voidaan myös suorittaa.

    Vain tällaisten testien ja laboratoriotestien monimutkaisuus, jossa on yleinen analyysi potilaan tilasta, auttaa määrittämään hepatiitin esiintymisen elimistössä, sen muodon ja vakavuuden asteessa. Heidän perusteellaan lääkäri voi määrittää jatkohoidon ja tehdä potilaan mahdollisen ennusteen.

    HCV, RNA kvantitatiivisesti [real-time PCR]

    Tutkimus tunnistaa aiheuttava aine hepatiitti C (HCV), jossa menetelmällä reaaliaikainen polymeraasiketjureaktio (RT-PCR) määritetään läsnä geneettisen materiaalin (RNA) viruksen ja sen tilavuus (viruskuorma) verinäytteestä.

    HCV-RNA voidaan havaita pitoisuutena, joka on pienempi kuin lineaarisen pitoisuusalueen alaraja. Lineaarinen pitoisuusalue on alue, jossa patogeenin kopioiden määrä voidaan laskea tarkasti. Tämän analyysin perusteella detektiovahvistimella määritetty HCV-DNA-pitoisuuden lineaarinen alue on 7,5 x 10 2 - 1,0 x 10 8 kopiota / ml näytettä.

    Venäjän synonyymit

    Hepatiitti C -virus (HCV), RNA: n kvantitatiivinen määritys.

    synonyymit englanti

    Hepatiitti C -virus-RNA, kvantitatiivinen, reaaliaikainen PCR, veri, HCV-viruskuorma, hepatiitti C -virus-RNA Quant.

    Tutkimusmenetelmä

    Polymeraasiketjureaktio käänteistranskriptiolla reaaliajassa.

    Mitä biomateriaalia voidaan käyttää tutkimukseen?

    Kuinka valmistautua asianmukaisesti tutkimukseen?

    Älä tupakoi 30 minuuttia ennen veren luovuttamista.

    Yleistä tietoa tutkimuksesta

    Hepatiitti C -viruksen (HCV) - RNA: ta sisältävien virus Flaviviridae, joka vaikuttaa maksaan. Se pystyy lisääntymään verisolujen (neutrofiilien, monosyyttien ja makrofagien, B-lymfosyytit) ja indusoivat cryoglobulinemia, Sjögrenin tauti, ja B-solujen lymfoproliferatiiviset tauti. Korkean mutaatioaktiivisuuden vuoksi HCV voi välttää immuunijärjestelmän suojamekanismien vaikutukset. On 6 genotyyppien ja monia alatyyppejä, joilla on erilaiset arvot ennustamiseen taudin ja tehokkuuden viruslääkitystä.

    Pääreitti lähetyksen - veren kautta (lääkkeitä verisolujen ja plasman, luovuttajan elinten, ei-steriilejä ruiskuja ja neuloja varten tatuoinnilla työkaluja, lävistyksiä). Todennäköisesti tartunta sukupuoliyhteydessä ja lapsi äidistä synnytyksen aikana, mutta tämä tapahtuu harvoin.

    Akuutti virusperäinen hepatiitti on pääsääntöisesti luonteeltaan oireeton, ja useimmissa tapauksissa se ei ole diagnosoitu. Vain 15% Tautia esiintyy Sairaiden - pahoinvointi, särky, ruokahaluttomuus ja laihtuminen (harvoin mukana keltaisuus). On 60-85% tartunnan saaneista kehittyy krooninen infektio, joka on 15 kertaa suurempi kuin taajuus kroonisen hepatiitti B Krooninen hepatiitti C tapahtuu lisäys maksan entsyymien ja huono oireiden ilmenemistä. 20-30%: lla potilaista tauti johtaa maksakirroosiin, mikä lisää maksan vajaatoiminnan vaaraa ja hepatosellulaarista karsinoomaa.

    HCV-RNA: n havaitseminen osoittaa viruksen lisääntymisen elimistössä ja on menetelmä taudin diagnosoimiseksi. Geneettisen materiaalin virus voidaan havaita PCR: llä 10-12 päivä infektion jälkeen - tänä aikana, spesifiset vasta-aineet, jotka on tuotettu useita kuukausia infektion jälkeen, eikä maksan toiminta ovat viite-alueella.

    PCR: llä virus-RNA havaitaan kvalitatiivisesti tai kvantitatiivisesti. Laadullisen menetelmän vuoksi hepatiitti C -viruksen esiintyminen ja sen aktiivinen lisääntyminen vahvistetaan. Viruksen kuormituksen kvantitatiivinen määritys ottaen huomioon HCV-genotyypin mahdollistaa nykyisen hoidon hallinnan ja ennustaa taudin kulkua.

    Hoidon teho arvioidaan RNA: n määrällä ennen hoitoa ja sen aikana. Veren viruskuormitus tyypillisesti vähenee useita kertoja onnistuneen hoidon ensimmäisten kolmen kuukauden aikana. Tehokkaalla hoidolla viremia laskee kahdella suuruusluokalla ensimmäisen 4-12 viikon hoidon aikana ja hoidon kulun päätyttyä viruksen geneettistä materiaalia ei havaita. Viremian vähenemisen puuttuminen 12 viikon kuluttua hoidon alusta osoittaa sen tehottomuuden. On suositeltavaa suorittaa analyysi ennen hoidon aloittamista, hoidon 4., 12. ja 24. viikkoa ja 24 viikon kuluttua kurssin päättymisestä. Hoidon kesto ja hepatiitti C -viruksen RNA: n kvantitatiivisen määrityksen tiheys riippuvat viruksen genotyypistä ja maksavaurion asteesta.

    Mihin tutkimusta käytetään?

    • Vahvojen hepatiitti C: n diagnosointi.
    • Ennustaa viruksen hepatiitti C: n kulkua.
    • Seuratakseen antiviraalihoitoa ja käsittelemään edelleen hoidon taktiikkaa.

    Milloin tutkimus osoitetaan?

    • Hepatiitti C -viruksen RNA: n kvalitatiivinen toteaminen.
    • Akuutissa ja kroonisessa virusperäisessä hepatiitissa C.
    • Sekahepatiitilla.
    • Antiviraalisen hoidon suunnittelussa, aikana ja sen jälkeen.

    Mitä tulokset tarkoittavat?

    • Sitä ei löydetty - hepatiitti C -virus-RNAa ei havaittu tai arvo on alle menetelmän herkkyysrajan (200 kopiota / ml = 400 IU / ml).
    • kopiot / ml (IU / ml) - hepatiitti C -virus-RNA havaittiin. Alhainen viremia (suotuisin ennuste sairauden kulusta ja hoidon tehokkuus).
    • > 2 x 10 ^ 6 kopiota / ml (> 4 * 10 ^ 6 IU / ml) havaittiin hepatiitti C -viruksen RNA. Korkea viremia.
    • > 1,0 * 10 ^ 8 kopiota / ml (> 2 * 10 ^ 8 IU / ml) - Hepatiitti C -virus-RNA havaittiin pitoisuuksina lineaarisen pitoisuusalueen yläpuolella.

    Lineaarinen alue HCV-RNA-pitoisuudet C määritetään havaitsemalla lämpösyklilaitteesta, oli 7,5 x 10 2-1,0 x 10 8 kopiota / ml (1,5 x 03-2 10 x 10 8 IU / ml).

    Mikä voi vaikuttaa tulokseen?

    Epäluotettava tulos voidaan saada seuraavilla tavoilla:

    • biomateriaalin saastuminen;
    • läsnäolo inhibiittoreiden näytteessä - kemialliset ja proteiini-aineet, jotka vaikuttavat PCR: n eri osiin;
    • läsnäolo hepariinin veressä.

    Tärkeitä huomautuksia

    • Veren viruskuormitustaso ei ilmaise maksavaurion ja taudin vaikeusastetta. Arviointia varten on tarpeen tutkia biokemiallisia indikaattoreita ja biopsiamateriaaleja.
    • Hoidon suunnittelussa on erittäin tärkeää määrittää hepatiitti C -viruksen genotyyppi.

    Se on myös suositeltavaa

    Kuka nimeää tutkimuksen?

    kirjallisuus

    • Vozianova Zh.I. Tarttuvat ja loiset sairaudet: 3 t - K.: Health, 2000. - T.1: 600-690.
    • Kishkun AA Immunologiset ja serologiset tutkimukset kliinisessä käytössä. - M.: MIA LLC, 2006. - 471-476 s.
    • Harrisonin sisäisen lääketieteen periaatteet. 16. painos. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
    • Lerat H, Rumin S, Habersetzer F ja muut. Hepatiitti C -viruksen in vivo tropismi genomisissa sekvensseissä hematopoieettisissa soluissa: viruskuorman, viruksen genotyypin ja solufenotyypin vaikutus. Verta. 1998 15. toukokuuta, 91 (10): 3841-9.PMID: 9573022.
    • Revie D, Salahuddin SZ. Ihmisolut ovat tärkeitä hepatiitti C -viruksen replikaatiolle in vivo ja in vitro: vanhoja väitteitä ja nykyisiä todisteita. Virol J. 2011 11. heinäkuuta 8: 346. doi: 10,1186 / 1743-422X-8-346. PMID: 21745397.

    PCR-tutkimus hepatiitti C: tyypit, indikaatiot, transkripti

    Viruslääke C on vakava sairaus, joka esiintyy maksavaurion kanssa. 80 prosentissa potilaista se kulkeutuu krooniseen muotoon. Virus kertoo maksasoluissa - hepatosyytteistä - ja aiheuttaa niiden kuoleman. Kuollut kudos on korvattu sidekudoksen fociin, fibroosi kehittyy.

    Kehittämisen kanssa maksafibroosin ei kykene suorittamaan toimintonsa, alkaa maksakirroosi, joka on vaarallinen sen komplikaatioita: kasvava paine porttilaskimon, ruoansulatuskanavan verenvuoto, veren hyytymisen heikentymistä mielialan muutokset johtuvat vahingoittaa aivoja ytimien myrkyllisiä aineita.

    Taudin syy on infektio virus Flaviviridae-perheestä, joka on RNA-viruksen tyyppi. Tämä tarkoittaa sitä, että geneettinen materiaali, jolla taudinaiheuttajan proteiinit syntetisoidaan, koodataan ribonukleiinihapon molekyylissä. Infektio tapahtuu veren kautta, seksuaalisesti, ja raskaana olevasta naisesta sikiöön. Valitettavasti vasta-aineiden ja vasta-aineiden tuotannon alkamisen välillä voi kulua varsin suuri aika - kahdesta viikosta kuuteen kuukauteen. Tämä ei salli infektion määrittämistä entsyymi-immunoanalyysimenetelmällä ja aloittaa hoidon alkuvaiheessa.

    Mikä on PCR-analyysi?

    PCR on molekyylianalyysimenetelmä, joka mahdollistaa patogeenin geneettisen materiaalin havaitsemisen jo ensimmäisellä viikolla infektion jälkeen käyttäen polymeraasiketjureaktiota. Tutkimuksella on suuri spesifisyys, tarkkuus ja se mahdollistaa viruksen läsnäolon tai poissaolon määrittämisen, mutta myös sen pitoisuuden ja genotyypin.

    Tutkimuksessa otetaan potilaan veri, jossa viruksen RNA: ta löytyy. Veri lisätään alukkeet - syntetisoida keinotekoisesti lyhyt pituus osia halutun geenin, ja RNA-polymeraasi - erityinen entsyymi, joka kertoo määrä geneettisen materiaalin patogeenin. Erikoislaitteiston avulla suoritetaan useita lämmitys- ja jäähdytysjaksoja. Materiaali analysoidaan sitten ja verrataan tunnettujen geenien viruksen pohjalta, joiden johtopäätös läsnä ollessa tai ilman tartuntaa.

    Hepatiitti C: n PCR-analyysityypit

    PCR-analyysissä on kolme tyyppiä:

    1. Laadullinen PCR-analyysi. Tutkimuksen ensimmäinen vaihe. Sen avulla voit tunnistaa viruksen geneettisen aineen veressä.

  • PCR: n kvantitatiivinen analyysi. Sen avulla voidaan määrittää viruskuorma - patogeenin geneettisen aineen pitoisuus yhden millilitran veressä. Tämä tutkimus suoritetaan ennen hoidon aloittamista ja sen jälkeen ensimmäisellä, neljäs, kahdestoistaosalla ja (jos kurssi on pitkä) kahdenkymmenenneljännen hoitoviikon tehokkuuden arvioimiseksi.

  • genotyypitys. Hepatiitti C: n aiheuttaja usein ja nopeasti mutatoi. Planeetalla havaittiin tämän viruksen genotyypin seitsemän varianttia. Venäjällä ensimmäinen, toinen ja kolmas tyyppi ovat yleisiä. Jokaisella genotyypillä on erilainen vastustuskyky hoidolle, esimerkiksi ensimmäisen tyypin hoidon tehokkuus on kuusikymmentä prosenttia ja toisen ja kolmannen osalta se saavuttaa kahdeksankymmentäviisi. Siksi, jotta voidaan valita sopivia lääkkeitä ja määrätä hoidon riittävän pitkä, on välttämätöntä määrittää tarkalleen minkä tyyppinen virus potilas on saanut tartunnan.
  • Indikaatiot hepatiitti C: n PCR-analyysille

    PCR-tutkimus on määrätty seuraavissa tapauksissa:

    • yhteydenpito sairauteen, joka voi johtaa infektioon;
    • positiivinen entsyymi-sitoutunut immunoanalyysi;
    • maksakirroosin merkit: muutokset maksan koossa, laajentunut perna, ihonalaisen laskimoplexuksen esiintyminen vatsaan;
    • maksavaurion oireiden ilmaantuminen: kipu vatsan oikealla puolella, ihon keltaisuus;
    • lisääntynyt ALT- ja AST-aktiivisuus biokemiallisessa verianalyysissä;
    • ennen hoidon aloittamista viruskuorman määrittämiseksi;
    • valvomaan antiviraalisen hoidon tehokkuutta;
    • hoidon päättymisen jälkeen relapsin seurantaan;
    • diagnosoidun hepatiitti B: n läsnä ollessa, jotta sekoitettaisiin maksan aiheuttamia maksavaurioita.

    PCR-tutkimuksen dekoodaus hepatiitti C: lle

    Hepatiitti C: n PCR-analyysin ja entsyymi-immunoanalyysin dekoodauksen tulee olla hepatiologin tai tartuntatautien erikoislääkäri. Analysoidaan PCR: n tulokset on tarpeen yhdistettynä biokemialliseen verikokeeseen, biopsiaan ja ultraäänitutkimukseen. Ainoastaan ​​pätevä lääkäri kykenee analysoimaan tutkimustuloksia ja määrittämään ne oikean hoidon perusteella.

    Laadullisen analyysin dekoodaus.

    Taudinaiheuttajan geneettinen materiaali löydettiin analysoidusta biologisesta materiaalista. Infektio on vahvistettu.

    Infektiota ei ole, tai patogeenin RNA-määrä on herkkyysrajan alapuolella.

    Kvantitatiivisen analyysin dekoodaus.

    Normaali luku terveille ihmisille. Se tarkoittaa, että testiaineessa ei ole hepatiitti C -RNA: ta tai sen pitoisuus on alle tutkimuksen herkkyyskynnys.

    RNA: n konsentraatio on alhaisempi kuin kvantitointialue. Tällaisia ​​tuloksia tulkitaan erittäin varovasti, korreloituvat muiden tutkimusten tietojen kanssa ja suorittavat usein toisen tutkimuksen.

    Virustason tasoa tietyllä pitoisuudella pidetään alhaisena. Yleensä viruksen määrän väheneminen tarkoittaa, että hoito onnistuu.

    Yli 8 x 10 ^ 5 IU / ml

    Virustason tasoa tietyllä pitoisuudella pidetään korkeana.

    Enemmän kuin 2,4 * 10 ^ 7 IU / ml

    RNA: n määrä ylittää kvantitointialueen ylärajan. Johtopäätökset viruskuorman asteesta tämän tuloksen kanssa ovat mahdottomia. Yleensä tällaisissa tapauksissa testi toistetaan verinäytteen laimennuksella.

    Genotyyppien dekoodaus.

    Erityisen genotyypin RNA havaittiin

    Biomateriaalissa hepatiitti C -virus havaitaan spesifisestä genotyypistä ja alatyypistä. Tulos on koodattu latinalaisin numeroina ja latinalaisin kirjaimin, esimerkiksi - 1a, 2b. Seitsemän genotyyppiä ja kuusikymmentäseitsemän alatyyppiä on olemassa, mutta Venäjällä on vain kolme ensimmäistä tyyppiä.

    Hepatiitti C -virus-RNA havaittiin

    Veressä RNA: sta löytyy harvinainen genotyyppi Venäjälle, jota ei voida katsoa johtuvan ensimmäisestä, toisesta tai kolmannesta tyypistä. Lisää tutkimusta tarvitaan.

    Tämä tulos osoittaa, että potilas on terveellinen tai että taudinaiheuttajan RNA-taso on liian pieni.

    Tilanne on mahdollista, kun hepatiitti C: n PCR-analyysi on negatiivinen ja entsyymin immuunimääritys havaitsee vasta-aineita virusta vastaan. Tämä tarkoittaa, että potilaalla on ollut hepatiitti C akuutissa muodossa ja parantunut. Noin kaksikymmentä infektion tapausta johtaa spontaaniin hoitoon, jos potilaan keho on riittävän vastustuskykyinen infektioon.

    Huolimatta siitä, että PCR on erittäin tarkka analyysi, sen tulokset voivat vääristyä seuraavissa tilanteissa:

    • veri kuljetettiin laboratorioon riittämättömissä olosuhteissa, lämpötilajärjestelyä loukattiin;
    • biomateriaalin näyte oli saastunut;
    • veressä oli jäljellä olevia jälkiä hepariinia ja muita antikoagulantteja;
    • Tutkittuna aineena olivat inhibiittorit - aineet, jotka hidastavat tai pysäyttävät polymeraasiketjureaktion.

    PCR: n edut muihin menetelmiin verrattuna

    1. Diagnoosi varhaisvaiheessa. PCR havaitsee taudin aiheuttavan aineen geneettisen materiaalin. Immunogluoresenssanalyysin avulla on mahdollista määrittää vain immunoglobuliinit - aineet, joita keho tuottaa vastauksena infektioon. C-hepatiitti-infektion tapauksessa tartunnan ja immuunivasteen puhkeamisen välinen aika voi olla useita viikkoja ja kuukausia, jolloin ELISA ei ole tehokas. PCR antaa vastauksen jo ensimmäisellä viikolla tartunnan jälkeen.

  • Pieni virheen todennäköisyys. Tutkituissa aineissa määritetään geneettinen materiaali, joka on tyypillistä vain yhdelle tyypille taudinaiheuttajia. Näin voit sulkea pois vääriä tuloksia. ELISA: n avulla virheet ovat mahdollisia, koska samanlaisia ​​vasta-aineita voidaan vapauttaa erilaisista viruksista - tällaisia ​​vasta-aineita kutsutaan ristireaktiiviseksi.

  • Korkea herkkyys. PCR voi havaita patogeenin RNA jopa pieninä määrinä. Tämä mahdollistaa piilevien infektioiden tunnistamisen.
  • Miten valmistaudutaan verensiirtoon PCR-tutkimuksessa

    PCR-analyysille laskimon verta kerätään hepatiitti C: lle. Yleensä kaksi verin osaa otetaan potilaan laskimoon kerralla: ensimmäinen lähetetään PCR: lle ja toinen ELISA: lle. Tämä tehdään, jotta voidaan tarkemmin arvioida, kuinka huonosti potilas on tartunnan saaneessa viruksessa, ja miten häiriönsieto taistelee sitä vastaan.

    Yleensä potilaalle vaaditaan seuraavia sääntöjä:

    • verikoe otetaan aamulla;
    • viimeisen aterian ja veren luovutuksen välisen tauon on oltava kahdeksan kymmeneen tuntiin;
    • kaksi tai kolme päivää ennen analyysia sinun on annettava paistettuja ja rasvaisia ​​ruokia ja alkoholia;
    • 24 tuntia ennen analyysia potilaan tulee välttää fyysistä rasitusta: älä kantaa painoja, älä käy kuntosalilla tai altaalla.

    Mikä on hepatiitti C -virus-RNA?

    Hepatiitti C -viruksen RNA-tutkimus on tärkein menettelytapa, jonka avulla potilaiden kesto ja hoitomenetelmät voidaan määrittää tarkasti. Taudin diagnosointi koostuu useista erilaisista verikokeista, kuten:

    • hepatiitti C: n markkereita (anti-HCV);
    • hepatiitti C -viruksen RNA: n (HCV RNA) havaitseminen.

    Ensimmäinen tutkimus tehdään ensimmäisellä epäillyllä hepatiitilla. Toinen vaihtoehto on merkittävin HCV-RNA: n hoidossa, joten harkitse sitä tarkemmin.

    Mikä on virus hepatiitti C?

    Viruslääke C tai HCV on tarttuva tauti, joka vaikuttaa maksaan. Infektio viruksen kanssa tapahtuu veren kautta. Voit saada tartunnan tekemällä verensiirto, kun lääketieteellisten instrumenttien sterilointisääntöjä ei noudateta. On vähemmän tapauksia, joissa tauti saadaan seksuaalisesti tai raskaana olevasta äidistä sikiöön. Hepatiitti C on 2 tyyppiä.

    Krooninen hepatiitti C on vaarallisin. Se on sairauden muoto, joka voi kestää koko eliniän. Se aiheuttaa vakavia ongelmia maksan toiminnassa, kuten kirroosi tai syöpä. 70-90 prosentilla tartunnan saaneista ihmisistä tauti läpäisee kroonisen vaiheen.

    Tärkein hepatiitti C: n vaara on, että se etenee salaa, ilman ortopedisia merkkejä. Tässä tapauksessa useimmiten valitetaan kuumetta, pahoinvointia ja oksentelua, fyysistä heikkoutta, lisääntynyttä väsymystä, ruokahaluttomuutta ja painoa. Tällöin maksakudosten pienen tiivistymisen taustalla sen pahanlaatuinen rappeutuminen tapahtuu usein. Tästä syystä viruksen hepatiitti C: tä kutsutaan usein "aikapommiksi" tai "rakastavaksi tappajaksi".

    Toinen taudin erityispiirre on sen hyvin hidas kehitys, jota arvioidaan kymmeniä vuosia.

    Tartunnan saaneet eivät yleensä tunne oireita eivätkä epäile todellista tilannettaan. Usein sairaus voidaan tunnistaa vain silloin, kun hän viittaa toiseen lääkäriin.

    Riskiryhmään kuuluvat:

    • lapset, jotka saivat hepatiitti C -virusta äideiltä;
    • huumeidenkäyttäjät;
    • ihmiset, jotka lävistäneet ruumiinosia tai tekivät tatuointeja ei-steriileiltä työkaluilta;
    • saivat luovuttajan veren tai elinten (vuoteen 1992, jolloin hemodialyysiä ei suoritettu);
    • HIV-tartunnan saaneita henkilöitä;
    • Lääketieteelliset työntekijät tartunnan saaneiden potilaiden kanssa.

    Hepatiitti C-RNA: n määritys

    HCV RNA: n määritelmä, jota kutsutaan myös hepatiitti C PCR: ksi, on biologisen materiaalin (verta) tutkimus, jolla voidaan määrittää hepatiittiviruksen erittäin genomin esiintyminen elimistössä (mikä yksittäinen virus on yksi ainoa RNA-osa).

    Tärkein koemenetelmä on PCR tai polymeraasiketjureaktiomenetelmä.

    HCV-RNA: n määrittämiseksi on olemassa kahdenlaisia ​​verikokeita:

    Laatustesti

    Laadullinen analyysi mahdollistaa sen, onko virus veressä. Kaikki potilaat, joilla on C-hepatiitti-vasta-aineita, pitäisi suorittaa testi. Tuloksista saat 2 vastausta: virus "läsnä" tai "puuttuu". Positiivisessa testituloksessa (löydetty) on mahdollista arvioida aktiivisen lisääntymisen virus, joka tartuttaa terveitä soluja maksassa.

    Testaus, joka suoritetaan korkealaatuiselle PCR: lle, viritetään erityiselle herkkyydelle, 10 - 500 IU / ml. Jos veressä oleva hepatiittivirus, jonka määrä on alle 10 IU / ml, viruksen havaitseminen voi olla mahdotonta. Viruksen spesifisen sisällön erittäin alhaista arvoa havaitaan potilailla, joille antiviraalinen hoito on määrätty. Siksi on tärkeää, että lääketieteellisen järjestelmän herkkyys on korkea, jotta voidaan diagnosoida ja määritellä kvalitatiivinen tulos polymeraasiketjureaktiossa.

    Usein C-hepatiitin polymeraasiketjureaktio suoritetaan välittömästi vasta-aineiden löytämisen jälkeen. Seuraavat testit, kun antiviraalinen hoito läpäisee, suoritetaan 4., 12. ja 24. viikolla. Ja toinen analyysi PVT: n päättymisen jälkeen suoritetaan 24 viikon kuluttua. Sitten - kerran vuodessa.

    Määrällinen testi

    PCR-RNA: n määrällinen analyysi, jota joskus kutsutaan viruskuormitukseksi, määrittää viruksen pitoisuuden (spesifisen sisällön) veressä. Toisin sanoen viruskuorma määritellään tietyn määrän virus-RNA: ta, joka voi olla tietty määrä verta (on tavanomaista käyttää 1 ml, yhtä kuin 1 cm kuutiossa). Testitulosten yksiköt ovat kansainvälisiä (standardi) yksiköitä jaettuna yhdellä millilitralla (IU / ml). Viruksen sisältö näkyy toisinaan eri tavoin, riippuen laboratorioista, joissa tutkimusta tehdään. Hepatiitti C: n tapauksessa kvantitointi käyttää joskus arvoja, kuten kopioita / ml.

    Olisi ymmärrettävä, että C-hepatiitin vakavuudesta ei ole erityistä riippuvuutta tämän kannan pitoisuudesta veressä.

    Viruksen kuormituksen tarkistuksen avulla voit määrittää taudin tarttuvan asteen. Niinpä riskit toisen henkilön viruksen lisääntymisestä lisääntyvät hepatiitin pitoisuuden kasvaessa veressä. Lisäksi viruksen korkea pitoisuus vähentää hoidon vaikutusta. Siksi pieni viruskuorma on erittäin suotuisa tekijä onnistuneen hoidon kannalta.

    Lisäksi hepatiitti C -testi ja sen määritys PCR: llä ovat tärkeä osa terapeuttisen taudin hoitoon ja hoidon onnistumisen määrittämiseen. Koetulosten perusteella suunnitellaan kuntoutuskurssi. Esimerkiksi hepatiittiviruksen spesifisen pitoisuuden liian alhaisella vähenemisellä antiviraalinen hoito on pitkittynyt ja päinvastoin.

    Nykyaikaisessa lääketieteessä uskotaan, että kuormitus on yli 800000 ME / ml. Kuormitetta yli 10000000 ME / ml pidetään kriittisenä. Mutta asiantuntijoilla eri maista ja tähän päivään ei ollut samaa mieltä viruksen kuormituksen rajoista.

    Määrällisen testin taajuus

    Yleensä hepatiittia koskeva kvantitatiivinen analyysi suoritetaan ennen antiviraalihoitoa ja kolme kuukautta hoidon päättymisen jälkeen hoidon laadun määrittämiseksi.

    Kvantitatiivisen testin tuloksena katsotaan kvantitatiivinen arviointi edellä määritellyn näytteen tuloksista. Tämän seurauksena annetaan lauseke "alle mitattu alue" tai "veressä ei löydy".

    Kvalitatiivisen testin herkkyysparametri on tavallisesti pienempi kuin kvantitatiivisen analyysin herkkyys. "Missing" transkripti osoittaa, että molemmat analyysityypit eivät löytäneet viruksen RNA: ta. Testillä "alle mitattu alue" kvantitatiivinen analyysi ei todennäköisesti löytänyt hepatiitti-RNA: ta, vaikka tämäkin vahvistaa viruksen, jolla on hyvin pieni spesifinen sisältö.

    Hepatiitti C ja sen genotyypit

    Genotyypin hepatiitti C-viruksen RNA: n läsnä olon diagnosoimiseksi eri geneettisen tyyppisiä hepatiitti C: Science tietää enemmän kuin 10 eri viruksen genomin, mutta hoitokäytännön riittävästi erottaa useita genotyyppejä, joilla on suurin osuus alueella. Geneettisen lajin määrittäminen on avainasemassa hoidon ajankohdan valitsemisessa, mikä on erittäin tarpeellista, jos otetaan huomioon hepatiitti-lääkkeiden laaja valikoima haittavaikutuksia.

    Menetelmät viruksen hepatiitti C: n hoidossa

    Ainoa tehokas tapa hepatiitti-viruksen parantamiseksi on pääsääntöisesti kahden lääkityksen yhdistelmä: interferoni-alfa yhdessä ribaviriinin kanssa. Erikseen nämä lääkkeet eivät ole niin tehokkaita. Lääkkeiden suositeltu annostus ja annostelun ajoitus tulisi määrätä vain lääkäriltä ja erikseen jokaiselle potilaalle. Näiden lääkkeiden käyttö voi kestää 6-12 kuukautta.

    Tänään ei ole keksitty huumeita, jotka takaavat 100 prosentin hyödyntämisen viruksesta. Kuitenkin asianmukaisesti valitulla hoidolla potilaiden parantuminen voi saavuttaa jopa 90% tapausten määrästä.

    Hepatiitti C: n kvalitatiivinen analyysi PCR: stä

    Hepatiitti on vakava sairaus, jolla on monia syitä alkamiseen. Kehityksen ytimessä on välitön tai epäsuora maksa. Kun otetaan huomioon sen merkitys koko elimelle, voidaan vain arvata kuinka huonosti patologia on. Tässä artikkelissa käsitellään yksityiskohtaisemmin kurssin ominaisuuksia ja hepatiitti C: n laboratoriodiagnoosia.

    Taudin syy on virus-aine, joka viittaa RNA: ta sisältäviin patogeeneihin. Se on erottamiskykyinen ominaisuus - kyky muuntua, eli muuttaa rakenteensa. Tämän infektion vuoksi se menettää immuunijärjestelmän hyökkäyksen ja useimmissa tapauksissa johtaa maksavaurion krooniseen tulehdukseen.

    Koska viruksen eri alatyyppejä esiintyy, lääkkeiden valinta olisi suoritettava ottaen huomioon genotyyppien tulokset. Huolimatta pitkästä tutkimuksesta HCV: n rakenteesta ja sen erityispiirteistä, ei ole ollut mahdollista kehittää erityistä rokotetta tautia vastaan.

    Varhaisen diagnoosin vaikeudet ovat hepatiitin oireeton kulku, jolloin henkilö siirtyy lääkärille kirroosin vaiheessa. Tauon havaitsemiseksi ajoissa tarvitaan säännöllisiä fyysisiä tutkimuksia. Vain veren laboratoriotesteillä voidaan tunnistaa HCV ja estää muiden infektio. Se tosiseikka, että infektion kantaja voi jo pitkään tietää patologian ja jatkaa viruksen lähettämistä terveille ihmisille.

    Lähetyspolut

    Virus useimmiten leviää veren läpi, koska se sisältää suurimman patogeenisten aineiden pitoisuuden. Siten infektio lähetetään:

    • hemodialyysillä;
    • kun pistät neulalla;
    • taistelun aikana, kun iho loukkaantuu ja hemokontaktia esiintyy;
    • verensiirto (verensiirto).

    Intiimin läheisyyden läheisyys on vähäinen, koska siemenneste ja emätinpurkaus sisältävät pienen määrän taudinaiheuttajia. Infektioriski kasvaa merkittävästi, jos sukupuolielinten limakalvon eheys vaarantuu. Tämä on havaittu aggressiivisella ja anaali seksi.

    Tartunnan vertikaalisen tartuntatavan suhteen se suoritetaan työn prosesseissa. Vatsan aikana patogeeni ei pääse tunkeutumaan istukkaan alkioon. Luonnollisissa lajikkeissa patogeeninen aine siirretään lapseen ihonsa traumassa, kun havaitaan äidin veren kosketusta.

    Kun taudinaiheuttaja tunkeutuu terveelliseen organismiin, alkaa vasta-aineiden synteesi, jotka ovat suojaa infektiolta ja kuuluvat immuunijärjestelmään. Ne löytyvät henkilön ensimmäisessä tutkimuksessa ELISAn avulla.

    Diagnoosin vahvistamiseksi potilas läpikäy polymeraasiketjureaktiota. Se on analyysi patogeenisen aineen geneettisen materiaalin tunnistamiseksi ja viruskuorman määrittämiseksi.

    Hepatiitti C: n laboratoriodiagnoosi

    Laboratorio diagnostiikka alkaa entsyymi-immunomäärityksellä. Sen päätehtävänä on havaita taudinaiheuttajaa vastaan ​​tuotetut vasta-aineet. Sen tehokkuus on lähes 95%. Tämän tutkimuksen ansiosta prekliinisessä vaiheessa on mahdollista tunnistaa viruskansiot ja lähettää se lisätarkastukseen.

    ELISA: n kvalitatiivinen analyysi osoittaa immunoglobuliinien esiintymisen tai puuttumisen potilaan veressä. Sen tulos voi olla "positiivinen" tai "negatiivinen". Saatuaan vastauksen ensimmäisen vaihtoehdon, henkilö siirtyy seuraavaan tutkimukseen - PCR. Sen hinta riippuu reagenssien laadusta ja laboratorioista. Polymeraasiketjureaktion kustannukset voivat saavuttaa 4 000 ruplaa.

    PCR: n ominaisuudet

    Polymeraasiketjureaktion avulla jopa pieni määrä biologista materiaalia mahdollistaa viruksen kuormituksen arvioimisen veressä eli laskettaessa patogeenien pitoisuutta millilitraa nestettä.

    PCR: n myötä hepatiitin diagnoosi oli paljon yksinkertaisempaa. Analyysi mahdollistaa HCV-RNA: n identifioinnin infektioprosessin vaiheen ja viruskantoaineen infektiivisyyden toteamiseksi.

    On olemassa useita geneettisen diagnoosin tyyppejä:

    1. hepatiitti C: n kvalitatiivinen analyysi - vahvistaa HCV: n läsnäolon tai puuttumisen tutkittavan veressä:
    2. määrällinen, minkä vuoksi on mahdollista laskea virusten pitoisuus ja määrittää taudin vaihe. Tulos annetaan IU / ml tai kopiot / ml (riippuen laboratoriosta);
    3. genotyyppaus on tarpeen HCV: n genotyypin määrittämiseksi. Tämä on välttämätöntä tässä tapauksessa tehokkaimmille lääkkeille. Analyysi osoittaa välillisesti patologisen prosessin vakavuuden maksassa. Näin ollen patogeenin kolmannella genotyypillä havaitaan usein steatosis, jonka kehittyminen on rasvan kertyminen hepatosyytteihin (sen solut). Lisäksi virustyyppi vaikuttaa terapeuttisen kurssin tulokseen ja kestoon.

    Hepatiitti C: n kvalitatiivinen analyysi PCR: stä

    Laboratorion ensimmäinen vaihe on tutkia biologista materiaalia HCV-RNA: n läsnäolosta. On tärkeää muistaa, että hepatiitti C: n kvalitatiivisella analyysillä on tietty herkkyys ja siksi se ei aina anna oikeaa vastausta. Tällöin on suositeltavaa suorittaa toistuva laboratoriodiagnoosi käyttäen muita reagensseja.

    Luotettavien tulosten saamiseksi tulisi käyttää testijärjestelmää, jonka herkkyys on vähintään 50 IU / ml.

    Diagnoosin tulos voi olla joko "positiivinen" tai "negatiivinen". Jos taudinaiheuttajaa ei löydetä verestä, tutkimus päättyy. Kun näytteessä havaitaan patogeeninen aine, tämän jälkeen suoritetaan viruskuorman määrällinen määrä.

    Väärin kielteinen vastaus syntyy, kun tekninen prosessi häiriintyy, esimerkiksi aktiiviset komponentit, jotka sortavat patogeenien kopioiden rakentamista ympäristöön. Näin ollen ei ole mahdollista näyttää todellista kuvaa verestä, jonka vuoksi ihmisen infektiota ei ole diagnosoitu.

    Vääriä positiivisia tuloksia voidaan saada, jos biologisen materiaalin keräysputki sekä tutkimusympäristö ovat saastuneet. Lisäksi tällainen analyysivaste on mahdollinen seka-infektiolla, kun maksassa on useita viruksia, esimerkiksi hepatiitti C ja D.

    Laadullisen tutkimuksen indikaatiot

    Lääkäri voi osoittaa kvalitatiivisen tutkimuksen potilaille hepatiitti C -virus-RNA: n toteamiseksi:

    • kun vastaanotetaan entsyymi-immunomäärityksen positiivinen tai kyseenalainen vastaus;
    • diagnoosin todentamiseksi;
    • viruskuormituksen määrittäminen;
    • taudin vaiheen pysäyttäminen;
    • seka-infektion diagnoosi. Usein hepatiitti C vaikuttaa maksaan samanaikaisesti kuin "D" -virus;
    • terapeuttisen taktiikan määrittäminen ottaen huomioon patogeenin genotyyppi;
    • muutosten dynamiikan arviointi antiviraalisten lääkkeiden hoidon taustalla.

    Polymeraasiketjureaktion etuja ovat:

    1. tekniikan korkea herkkyys, joka mahdollistaa infektion tosiasiallisen esiintymisen prekliinisessä vaiheessa;
    2. taudinaiheuttajan geneettisen materiaalin tunnistaminen eikä sen vasta-aineita;
    3. mahdollisuus perustaa patogeenisen aineen alatyyppi;
    4. nopea diagnostiikka, koska ei ole tarpeen kylvää materiaalia ravintoalustalla, mutta riittää, että käytetään erityisiä testijärjestelmiä. Henkilö saa tuloksen 5 tunnin kuluttua;
    5. monipuolisuutta. Analyysi mahdollistaa geneettisen materiaalin (RNA, DNA) tunnistamisen. Tästä johtuen lääkäri voi vahvistaa hepatiitti C: n ja muun tyyppiset sairaudet (B);
    6. mahdollisuus havaita piilevä infektio.

    Määrällinen tutkimus

    Veressä, jossa on polymeraasiketjureaktio, on mahdollista laskea patogeenien määrä kiinteässä määrin biologista materiaalia. Indikaattori esitetään IU / ml. Analyysin ansiosta on mahdollista määrittää potilaan infektiokyvyn aste infektioprosessin vaiheen määrittämiseksi ja myös lääkehoidon tehokkuuden arvioimiseksi.

    PCR: n perusteella asiantuntija päättää, mitkä lääkeannokset voivat estää taudinaiheuttajien leviämisen. Lisäksi määritetään antiviraalisen hoidon kesto ja eliniän ennuste. On tärkeää muistaa, että testijärjestelmät ovat erittäin herkkiä, joten menetelmä mahdollistaa ihmisperäisen infektion vahvistamisen myös prekliinisessä vaiheessa.

    genotyypitys

    Koska aiheuttavan aineen kyky mutatoida, määritellä hoidon taktiikat ja antiviraalisten lääkkeiden valinta, sen genotyyppi on tarpeen. Esimerkiksi hepatiitti HCV 1: n hoito kestää 48 viikkoa, kun positiivinen kehitys havaitaan vain 60 prosentissa tapauksista. Genotyypeillä 2 ja 3 on suotuisampi ennuste. Antiviraalisia lääkkeitä määrätään 8 kuukautta ja niiden teho on 85%.

    Tilastotietojen mukaan useimmissa tapauksissa HCV 1, 2 ja 3 rekisteröidään Venäjän federaation alueella.

    Laboratoriotutkimuksen desiguroinnissa tällainen vastaus voidaan ilmaista - "ei kirjoitettu". Tämä tarkoittaa, että virus liikkuu potilaan verenkiertojärjestelmässä, jota testijärjestelmä ei tunnista. Analyysin tuloksena tässä tapauksessa tarkoitetaan sellaisen henkilön infektiota, joka on epätyypillinen aiheuttajan tietylle maantieteelliselle alueelle.

    Kuinka saada luotettavia tuloksia?

    PCR: n kvalitatiiviseen tutkimukseen hepatiitti C: n aiheuttavan aineen RNA: n havaitsemiseksi on osoitettu oikeat tulokset, on noudatettava laboratoriodiagnoosin valmisteluvaatimuksia:

    1. verinäytteet suoritetaan tyhjälle vatsaan ja "nälkäinen" aukko ei saa olla lyhyempi kuin 8 tuntia;
    2. kaksi päivää ennen tutkimusta on suositeltavaa lopettaa alkoholin käyttö ja kieltää teräviä, rasvaisia ​​ja savustettuja ruokia;
    3. poistaa veren hyytymistä vähentävien lääkkeiden, kuten hepariinin, käyttöönotosta. Jos näitä lääkkeitä määrätään elinkautisista syistä, sinun tulee ilmoittaa asiasta lääkärille. Lisäksi erikoislääkärin tulee olla tietoinen muiden lääkkeiden käytöstä, jotka voivat vaikuttaa laboratoriokokeeseen;
    4. Biologisen materiaalin keräämisen aattona ei tulisi suorittaa fysioterapeuttisia menetelmiä, joihin kohdistuu voimakasta fyysistä rasitusta.

    Analyysin tuloksiin voi vaikuttaa paitsi veren luovuttaja myös muut tekijät, nimittäin:

    • huono veren keräys;
    • biologisten aineiden kuljetusta koskevien suositusten noudattamatta jättäminen;
    • laboratoriotyöntekijöiden riittämätön koulutus;
    • tutkimusmenetelmien noudattamatta jättäminen;
    • antikoagulanttien (hepariini) käyttöönotto verinäytteiden aattona. Tämä lääkeryhmä vähentää yhteensopivuutta, mikä hidastaa reagenssien työtä.

    Eri laboratorioissa diagnostinen vaste voi olla hieman erilainen, mutta nämä virheet eivät vaikuta tutkimuksen lopputulokseen.

    Erityistä huomiota kiinnitetään laboratoriossa käytettäviin testausjärjestelmiin. Usein etusija annetaan reagoiville aineille, joilla on suuri herkkyys. Tämä on tärkeää potilaille, joilla on alhainen virustartunta, koska sitä on vaikea havaita.

    Kuinka usein tehdään laboratoriotesti?

    Ensisijaisesti polymeraasiketjureaktio suoritetaan ihmisillä, jotka on testattu hepatiittiviruksen vasta-aineille immunologisessa määrityksessä. Tällöin se on nimetty vahvistamaan henkilön infektion tosiseikka ja määrittämään taudin vaihe. Lisäksi analyysin avulla voit määrittää viruksen alatyypin, joka on erityisen tärkeä lääkkeiden valinnassa.

    Seuraava pakollisen laboratoriotutkimusaika on 3 kuukautta antiviraalisen hoidon alusta. Diagnoosi tarjoaa mahdollisuuden arvioida lääkkeiden tehoa, säätää annosta tai korvata ne.

    Perusanalyysien lisäksi PCR voidaan suorittaa lisäksi 4 ja 24 viikon kuluttua hoidon alusta. Taudin positiivinen ennuste varmistetaan viruskuorman vähenemisellä kolmen kuukauden hoidon jälkeen. Niinpä sen pitäisi esimerkiksi pienentyä miljoonasta IU / ml: sta useisiin satoihin tuhanteen.

    Jos konsentraatio patogeenien veressä pysyi samalla tasolla tai hieman kasvaa, mikä ilmaisee tehottomuus viruslääkkeiden ja vaativat tilalle. PCR: n avulla hoidon lopussa on mahdollista vahvistaa potilaan toipuminen.

    Laboratoriodynamiikan tulosten oikea tulkinta edellyttää hepatiitti- tai tartuntatautien asiantuntijan kuulemista. Kun otetaan huomioon ELISA: n väärien vastausten korkea esiintyvyys, analyysiä käytetään yksinomaan primaariseen seulontaan. Potilaan perusteellisempaa tutkimista varten käytetään polymeraasiketjureaktiota.

    Voidaanko hepatiitti C parantaa ilman sivuvaikutuksia?

    Tänään, moderni lääkkeet ja uuden sukupolven sofosbuviiri Daklatasvir kanssa 97-100% todennäköisesti ikuisesti parannan teitä C-hepatiitin Uusin lääkitys on saatavilla venäjän virallinen edustaja Intian farmgiganta Zydus Heptiza. Lähettäjä toimittaa tilatut tuotteet 4 päivän sisällä, maksun vastaanottamisen jälkeen. Hanki ilmainen kuulemistilaisuus nykyaikaisten huumeiden käytöstä sekä oppia osto-optioista Zydus-tavarantoimittajan virallisilla verkkosivuilla Venäjällä.


    Aiheeseen Liittyviä Artikkeleita Hepatiitti