PCR-diagnostiikan käyttäminen

Share Tweet Pin it

Polymeraasiketjureaktiota (PCR) molekyylibiologiassa kutsutaan kokeellisen menetelmän viruksen havaitsemiseksi. Sen avulla voidaan merkittävästi lisätä tiettyjen nukleiinihappojen (DNA) pitoisuuksia biologisissa näytteissä, mikä mahdollistaa niiden tunnistamisen ja tunnistamisen.

Analyysi suoritetaan seuraavasti. Geneettinen aine (verinäyte), joka voi mahdollisesti sisältää haluttua geeniä, viedään koeputkeen. Siellä sijoitetaan myös alukkeet - kemiallisesti syntetisoidaan halutun geenin pienet pituudet.

Myös DNA- tai RNA-polymeraasi lisätään astiaan, se kykenee rakentamaan nukleiinihappoketju, joka on täysin identtinen alkuperäisen kanssa. Tulokseksi saatuun koostumukseen lisätään myös neljä vapaata nukleotidia, RNA: lle tai DNA: lle erityinen rakennusmateriaali, joista yksi sisältää fosforin radioaktiivisia partikkeleita.

Tuloksena oleva seos kuumennetaan 95 - 96 ° C: een, minkä takia kaksi tavanomaisessa tilassa yhteenlaskettua DNA-heliksia hajotetaan. Sitten valmiste jäähdytetään, tällä hetkellä alukkeet kiinnittyvät viruksen genomin haluttuun alueeseen antamatta RNA: ta (tai DNA: ta) muodostamaan kaksoishelix uudelleen.

Jäähdytyksen aikana polymeraasi hakee vapaata nukleotidiketjua. Tämän entsyymin toimivuuden kannalta tarvitaan yksi ainoa nukleotidiketju. Koska polymeraasi liukuu pitkin DNA-juostea (kuten rengas köydessä), se ei voi toimia kaksinkertaisella kierteellä.

Tämän jälkeen suoritetaan toistuva lämmitysjakso, jonka takia nukleotidiketjut erotetaan toisistaan. Jokaiselle näistä PCR-sykleistä näytteessä halutun hepatiittigeenin määrä kasvaa geometrisessa etenemisessä ja loput geneettisestä materiaalista muodostetaan lineaarisesti.

Sen jälkeen, kun nukleotidijäännösten liuos on puhdistettu ja DNA-juosteet erotettu molekyylipainoparametrilla elektroforeesista, on helppo määrittää, onko haluttu geeni olemassa testattaessa tai ei.

PCR: n edut

PCR-menetelmää käyttävä laboratoriotutkimus antaa mahdollisuuden saada enemmän tietoa kuin pelkkä RNA-viruksen läsnäolo. Radioaktiivisen säteilyn parametrin määrittämisessä on mahdollista määrittää, mikä määrä geneettistä materiaalia oli alun perin tutkittavalle näytteelle. Jos kyseessä on hepatiitti, määritä viruskuormitustaso.

Tämän menetelmän toinen etu on CR-reaktion hyvin suuri herkkyys. Se on paljon korkeampi kuin klassiset menetelmät virusten havaitsemiseksi. Ihanteellisesti, halutun geenin tunnistamiseksi, vain yksi näytteessä oleva virus on riittävä PCR: lle.

Lisäksi PCR on täysin spesifinen. Sen alukkeet on luotu siten, että ne vastaavat täysin haluttujen geenien ainutlaatuisia osia, joita mikään muu sekvenssi ei ole. Molemmat sormenjäljet ​​ovat ainutlaatuisia, ja jokaisessa geenissä on ainutlaatuisia nukleotidisekvenssejä.

Laadullinen PCR-analyysi

Laadullinen analyysi paljastaa vain viruksen läsnäolon veressä. Tämä testi olisi tehtävä kaikille potilaille, joilla on todettu olevan hepatiitti C: n vasta-aineita veressään. Tulos voi olla vain yksi kahdesta arvosta: "havaittu" tai "ei havaittu". Terveessä ihmisessä normaalia (viitearvoa) ei pitäisi "havaita".

Myös kvalitatiivisen tutkimuksen tuloksista on erityinen tulkinta:

  • Tulos on "löydetty". Tämä tarkoittaa sitä, että biologisen aineen näytteen ottanut havaittiin RNA-fragmentti, joka on spesifinen hepatiitti C -viruksen Näin ollen, on se, että potilaan hepatiitti B-viruksen infektion C. Jos tulos laadullinen PCR "löysi", se osoittaa, että virus toistojen ja tällä hetkellä se tarttuu uusiin maksasoluihin kehossa.
  • Tulos on "ei havaittu". Sellainen päätös osoittaa, että näytteessä saatua biologista materiaalia RNA-fragmenttia ei havaittu laboratoriossa, joka on spesifinen joko HCV-RNA sama pitoisuus patogeeni-infektion näyte oli alle raja testin herkkyys.

Hepatiitti C -virus-RNA: n akuutissa vaiheessa kvalitatiiviset tutkimukset, joissa PCR-tekniikkaa käytetään, voivat paljastua 1-2 viikon kuluttua kehon infektoitumisen jälkeen, toisin sanoen paljon ennen hepatiitti-vasta-aineiden esiintymistä.

Tällaisen tutkimuksen analyyseistä voi olla epäluotettavia tuloksia:

  • saastunut biomateriaali;
  • hepariinin läsnäolo potilaan veressä;
  • läsnäolo kemiallisissa tai proteiini-aineissa (inhibiittoreissa), jotka vaikuttavat PCR: n eri komponentteihin.

PCR: n kvalitatiiviseen analyysiin ei tarvita potilaan erityistä valmistelua tutkimusta varten. Laskimoveria käytetään materiaalina.

Tulosten arviointi

Laadullisilla PCR-testeillä on tietty herkkyys, ja tutkimuksen ja laitteiston tason mukaan laboratoriossa voi vaihdella 10-500 IU / ml.

Tämä tarkoittaa sitä, että jos verinäytteessä oleva virus on hyvin pienellä pitoisuudella (pienempi kuin tietyn laboratorion herkkyysraja), potilaspotilaat voidaan määrittää "ei havaittu". Tämän vuoksi, toteutettaessa kvalitatiivinen analyysi PCR alhainen viremian (virus pieni pitoisuus), esimerkiksi potilailla, jotka saavat hoitoa antiviraalisen hoidon, on tärkeää tietää, ja kynnys herkkyyden diagnostinen järjestelmä.

Diagnostiikkajärjestelmien variantit

Virologisen vasteen kontrolloimiseksi antiviraalista hoitoa suositellaan käyttämään diagnostisia järjestelmiä, joiden herkkyysraja on vähintään 50 IU / ml. Nämä kriteerit täyttyvät, esimerkiksi: analysaattorit Cobas Ampicolor HCV-testi (c tarkkuus on 50 IU / ml) ja RealBest HCV-RNA (herkkyydellä 15 IU / ml).

WHO: n mukaan suosituksia annetun lopullisen diagnoosin hepatiitti C, sen tulee perustua yksinomaan triple tehtyjen RNA-viruksen seeruminäytteitä potilaasta, jolla ei ole muita hepatiitti merkki lajeja.

PCR-menetelmien lisäksi käytetään myös TMA-tutkimusta (transkriptionaalisen monistumismenetelmän) HCV-RNA: n havaitsemiseksi potilailla. Se on paras herkkyysraja (5 - 10 IU / ml), mutta maassamme tämä testausmenetelmä ei ole vielä kovin yleinen.

Virusten havaitut muunnokset

Tämä kvalitatiivinen määritys hepatiitti C -viruksen RNA: n seerumissa mahdollistaa tämän viruksen useiden genotyyppien määrittämisen. Tällä hetkellä tiede tietää tämän viruksen yli kuusi genotyyppiä sekä noin 10 alatyypin taudista.

Maassamme on yleisiä 1, 2, 3 genotyypin viruksia. Laboratoriot voivat tunnistaa seuraavat genotyypit: 1a ja 1b, 2a, 2b ja 2c ja 3, 4, 5a ja 6, alatyypeistä riippumatta. Kaikille virusmuutoksille havaitsemisen spesifisyys on 100%.

PCR: n kvantitatiivinen analyysi

Kvantitatiivisen PCR-testin avulla määritetään hepatiittiviruksen taso verinäytteissä (viruskuorma). Tämä viremian (viruksen pitoisuus) testin avulla voit määrittää tietyn geneettisen materiaalin (viruksellisen RNA: n) yksiköiden lukumäärän, joka havaitaan tietyssä määrin. Tässä tapauksessa määritä sen pitoisuus 1 ml: ssa, mikä vastaa 1 um. cm.

Analyysin kvantitatiiviset parametrit ilmaistaan ​​lukuina, joita käytetään yksikköinä mittausyksikköinä yksikköinä (IU) millilitraa kohti (ml), ilmaistuna ME / ml. Joissakin laboratoriossa viruksen määrä voidaan määrittää muilla yksiköillä: kopioiden määrä millilitraa kohden on merkitty kopioksi / ml.

  • Aikataulu: C-hepatiittiä varten PCR: n tällainen kvantitatiivinen analyysi suoritetaan juuri ennen hoidon aloittamista. Sitten 1., 4., 12. ja 24. viikolla. Arviointi 12. viikolla on suuntaa antava, sen avulla voidaan määrittää hoidon tehokkuus.
  • Valmistelu analyysiin. PCR: n kvantitatiivista analyysiä varten potilaan erityistä valmistetta tutkimusta varten ei tarvita. Puoli tuntia ennen näytteenottoa, et saa tupakoida. Laskimoverta käytetään laboratoriomateriaalina.

Tulosten arviointi

Eri laboratorion testausjärjestelmissä tämän indikaattorin vaihteluvälit ovat IU / ml. Keskimäärin käytetään konversioparametria, jossa 4 kopiota / ml = 1 IU / ml. Tämä tarkoittaa sitä, että jos laboratorio antaa PCR-analyysin tuloksen 2,4 * 10 6 kopiota / ml, niin tämä parametri tulee jakaa 4: llä ja saamme 6 * 10 5 IU / ml.

Suurta kuormitustasoa 800 000 IU / ml pidetään suurena, mikä vastaa suunnilleen 3 000 000 kopiota / ml. Joidenkin kirjoittajien mukaan matala viremia vastaa kvantitatiivisen PCR: n parametreja alle 400 000 IU / ml.

Kvantitatiivisen testin tuloksena lopulliset tulokset voidaan toimittaa ei digitaalisen arvon muodossa, vaan "mittausalueen alapuolella" tai "ei havaittu".

  • Arviointi: "mittausalueen alapuolella". Tämä osoittaa, että kvantitatiivinen testi ei onnistunut havaitsemaan hepatiitti C -virus-RNA: ta, mutta itse virus on läsnä kehossa hyvin pienissä pitoisuuksissa. Tämä on osoitettu ylimääräisellä kvalitatiivisella testillä, joka vahvistaa viruksen läsnäolon.
  • Arviointi: "ei havaittu". Tämä tulos osoittaa, että kvantitatiivisella testillä ei havaittu virusta RNA-näytteessä.

Vektorin kuormituksen parametri määrittää ensinnäkin sairauden infektiivisyyden asteen, potilaan "infektiivisyyden". Mitä korkeampi potilaan pitoisuus viruksessa, sitä todennäköisempää on siirtää se muille ihmisille. Esimerkiksi, kun harrastat seksiä sairastuneella henkilöllä tai pystysuoralla polulla. Tällainen kvantitatiivinen indikaattori auttaa myös määrittämään potilaan hoidon tehokkuuden.

PCC: n kvantitatiivinen analyysi on tärkeä antiviraalisen hoidon kannalta, sen onnistumisen arvioimiseksi ja kurssin keston ajaksi. Joten, kun kehon nopea vaste hoitoon ja vähäinen viremia, hoidon kestoa voidaan vähentää.

Koska kvantitatiivisen PCR-parametrin hidas lasku, antiviraalista hoitoa on laajennettava tai muunnettava. Jos viruksen kuormituksen taso on alhainen, tämä on edullinen hoidon tekijä, jos se on korkea, silloin sovellettu hoitomenetelmä on tehoton ja lääkkeitä tai niiden käyttötapoja on muutettava.

PCR-menetelmän tehokkuus: infektioiden diagnosointi

PCR - infektioiden diagnosointi, moderni ja erittäin tarkka tapa havaita eri tartuntataudit. Mikä on erilainen kuin muut testit?

PCR-tutkimus: tärkeimmät edut

Tämä lyhenne tarkoittaa "polymeraasiketjureaktiota". Se, kuten Wikipedia sanoo, oli keksitty vuonna 1983 Cary Mullis, amerikkalainen tiedemies. Hänen löydöstään hän sai Nobelin palkinnon.

Hieman PCR: tä käytettiin vain tieteellisiin tarkoituksiin sen jälkeen, kun se onnistui lainaamaan lääkettä. Tutkimuksen ydin on tunnistaa tartunnan aiheuttava aine DNA: n ja RNA: n tasolla. Jokainen patogeeni, joka tulee DNA: han, muuttaa rakenteensa tiettyä tyyppiä noudattaen. Muunnetun DNA: n muoto on, että laboratorion avustajalle selviää, mitä tauti on piilossa ihmiskehossa. PCR: n muita etuja:

  1. Infektioiden perimmäisen syyn selvittäminen, joka jätti "jälkiä" DNA: ssa. Useiden sairauksien yhdistelmällä on vaikea tunnistaa se, jolla kaikki alkoi. Ja oikean diagnoosin ja tehokkaan hoidon valitsemiseksi ketjureaktio on erittäin tärkeä;
  2. PCR: ssä ei ole pelkästään muunnettua DNA: ta, vaan myös erityinen transformaatioalue. Tämä on välttämätöntä poistamaan epäilyksiä väärien infektioiden varalta.
  3. PCR-diagnoosi on niin herkkä, että se havaitsee jopa yksittäiset bakteerit ja virukset. Ne voivat jäädä veren jälkeen väärin säädetyn hoidon tai suunnittelemattoman lääkityksen keskeytyksen jälkeen. Pienin diagnosoitu määrä PCR-10-solujen patogeenien dekoodauksen aikana. Muut testimenetelmät eivät ole niin tehokkaita;
  4. Patogeenisiä mikro-organismeja esiintyy myös ilman STD: iden vakavia oireita. Tällaisen taudin varhaisessa vaiheessa havaittua ei käsitellä niin pitkään kuin sen laiminlyödyt muodot;
  5. PCR: n tulokset potilas saa kätensä riittävän nopeasti. Infektioiden diagnoosi kestää enintään 4-6 tuntia. Yhdessä dekoodauksen kanssa koko prosessi kestää enintään 1-2 päivää;
  6. Kerran otettu DNA-materiaali riittää pitämään 5-6 näytettä. Potilaan ei tarvitse ottaa smearia useita kertoja;
  7. PCR ja infektioiden tutkimus eivät pysy paikallaan, tämä alue kehittyy jatkuvasti. Uusia yliherkkyyttä testivälineitä kehitetään ja tutkimuskustannuksia vähennetään. Jos ennen sitä oli käytettävissä vain asukkaille megacities, nyt ilman häntä ei ole määritelty taudin lääkärit poliklinikka poliklinikat alueilla.

PCR-menetelmän ominaisuudet:

  1. Tarkkuus (virheet ovat vähäiset ja niiden taajuus ei ylitä 0,01%);
  2. Herkkyys (testi "laskee" yksittäiset bakteerit veressä ja tahriin);
  3. Spesifisyys (PCR tunnistaa infektiot, joita usein ei ilmene lainkaan vaikean vaiheen jälkeen);
  4. Ainutlaatuisuus (analyysit ovat tehokkaita tilanteissa, joissa muut tutkimukset eivät paljasta mitään).

PCR-analyysin tulokset

Miten ketjureaktio toimii, miten valmistautua analyysiin?

Ketjureaktio laboratoriossa olettaa DNA: n ja RNA: n eri osien moninkertaistumisen, jotta löydettäisiin hyvin katkottu linkki. Amplify (kaksinkertaistuvat) hapot entsyymivalmisteiden avulla. Käyttämällä entsyymejä laboratorioteknikko saa riittävän määrän kopioita DNA: n patogeenisestä osasta vertailemalla sen PCR: tä infektion aiheuttamaan erilaisiin sairauksiin.

Käytännössä käytetään aidan tai tahran avulla otettuja biologisia materiaaleja. Identifioimiseksi (sukupuolten infektioiden tulkitseminen), emättimen, kohdunkaulan tai virtsaputken leviäminen otetaan PCR: ään. Joskus myös virtsaa käytetään.

Vahvista tai kieltää hepatiitin, toksoplasmoosin tai HIV: n läsnäolo veren kautta laskimoon. Sormista otettu veri saa usein vääriä negatiivisia tuloksia. Mononukleoosi diagnosoidaan materiaalin keräyksen jälkeen. Tuberkuloosi voidaan tunnistaa ysköksen keräyksen jälkeen, joka on runsaasti varattu potilaille aamulla.

PCR: n emättimen ja kohdunkaulan tahra on yksinkertainen analyysi, jota ei pidä pelätä. 2-3 päivää ennen kuin on tarpeen luopua seksuaalisesta elämästä. Samanaikaisesti on kiellettyä käyttää geelejä ja saippuaa emäksisessä muodossa henkilökohtaiseen hygieniaan. Se voidaan pestä normaalilla vedellä hanan alla. Viimeinen pesu on illalla ennen aamupäivää laboratoriossa tai lääkärintoimistossa.

Jauheen käsittely voiteiden, voiteiden, peräpuikkojen tai suihkeiden avulla, jos se toteutetaan, on myös toivottavaa lopettaa. Smear annetaan ensimmäisinä päivinä kuukautisten tai välittömästi sen jälkeen. Tarkempien tulosten saavuttamiseksi on suositeltavaa, ettei käymään WC: ssä 2-3 tuntia ennen kuin PCR-tahra otetaan.

Ihmisille mielialaa käytetään virtsaan pistävästä tahrasta ketjureaktioon. Biologinen materiaali kerätään steriilillä koettimella tai puuvillakankaalla, joka on asetettu virtsaputkeen. Menettelyn aikana voi olla lievää epämukavuutta tai polttavaa tunnetta. Myös miesten on väliaikaisesti luovuttava seksistä ja hygieniasta. Viikkoa ennen analyysia antibioottien ja muiden lääkkeiden hoito lopetetaan. Jos aitauksen jälkeinen epämukavuus säilyy, on suositeltavaa ottaa yhteyttä poliklinikalle pian.

Oletetaan, että tutkimuksessa käytetään verta tai potilaan sukupuolielimistä otettua tahraa. Geneettinen materiaali sijoitetaan PCR: n vahvistuslaitteeseen, siihen lisätään myös entsyymejä. DNA: ta kuumennetaan 90-95 ° C: seen, kunnes ketju hajoaa useisiin linkkeihin. Tätä prosessia kutsutaan denaturaatioksi. Reaktorin toiminnan aikana yhdestä DNA- ja RNA-näytteestä syntyy tuhansia analyysejä (dekoodaamalla reaktio) sen kopioiden tuloksesta.

PCR-diagnoosin tulokset

Ketjureaktio osoittaa paitsi infektion esiintymisen myös tarkka patogeenien lukumäärän. Viime vuosien kehitys - mutaatioiden geenien keinotekoinen käyttöönottaminen ihmisen DNA: ssa genotyypin muutosalttiuden tunnistamiseksi.

Mitä PCR-infektion diagnoosi havaitsee?

Lääkäri näkee yleensä analyysin tuloksen tulkinnan erikseen. Ketjureaktion ominaisuudet antavat mahdollisuuden vahvistaa tai kieltää seuraavien sairauksien läsnäolo:

  1. Tuberkuloosi.
  2. Helicobacter pylori -infektio, usein vatsakivun syy, ilman mitään ilmeistä syytä.
  3. Suuontelon, emättimen, hengitysteiden ja virtsaputken kandidaasi.
  4. Listeriosis (immuunijärjestelmän suojaavien solujen kuolema ja hermoston tuhoutuminen).
  5. Tick ​​borreliosis (patogeenisten bakteerien aiheuttama, jota kutsutaan myös Lyme-taudiksi). Lyme-taudin esiintyminen on mahdollista vain PCR: n kautta.
  6. Tick-borne encephalitis (keskushermoston virusvauriot).
  7. Papillomavirusinfektio on yleinen urooppisen infektion tyyppi, joka on helppo siirtää suojaamattoman yhdynnän kautta. Ilmeisesti ilmaantunut sukupuolielinten syyliä tai syyliä sukupuolielimissä. Vaarallinen, että se voi vaikuttaa ruokatorveen, peräsuoleen ja muihin elimiin. PCR: n tulosten salaaminen mahdollistaa viruksen tunnistuksen alkion vaiheessa, johon ei liity mitään ulkoisia oireita.
  8. Ureaplasmoosi on mikro-organismeista Ureaplasma urealyticum. Monien vuosien ajan hän pystyy elämään ihmiskehossa, joka ei mitenkään ilmaise itseään. Se ilmenee, kun tavanomainen mikrofluora häiriintyy.
  9. Bakteerivaginoosi. Normaalisti bakteerit-gardnerelli elävät naisvartaloissa, eivät aiheuta terveysongelmia. Antibioottien vastaanotto, seksikumppanien usein tapahtuva muutos, stressit häiritsevät emättimen tasapainoa. On dysbakterioosi, nimeltään gardnerellezom.
  10. Chlamydia on kiistaton mestari STD: iden joukossa. Se johtuu virusbakteereista - klamydia. Vuosittain noin 100 miljoonaa ihmistä on saanut tartunnan.
  11. Mykoplasmoosin. Akuutti sairaus, joka välitetään vain kahden vastakkaista sukupuolta olevan kumppanin sukupuolella. Useammin, ennen PCR-testiä, se katoaa salpingiitin tai endometritin peitteen alla.
  12. Trichomoniasis on klamydian kilpailija "suosion" suhteen. Sitä voidaan hoitaa, jos se hylätään, infektio johtaa lapsettomuuteen, raskauden sairauksiin, eturauhastulehdukseen ja kystiin.
  13. Herpesisairaudet. On epätodennäköistä, että sairas ihminen muistaa, millaista vihainen vihollinen hänellä on, kun hän kärsii angina pectorista tai sidekalvotulehduksesta. Eri tyyppiset herpes vaikuttavat kurkkuun, sukupuolielimiin, silmän ja ihon limakalvoihin. Hän naamioituu murskaaviksi kurkkukaduiksi, röyhtyiksi, sitten runsaasti kyyneliä, kunnes tutkimusta tehdään.
  14. Sytomegalovirus. Bakteerit, jotka löytyvät kehossa, eivät koskaan häviä. He tunkeutuvat AIDS-potilaiden verisairauksiin, joille on tehty toimenpide, jolla siirretään yksi tai toinen elin, joka ottaa lääkkeitä immuniteetin estämiseksi. Oireet: pitkittynyt kuume, johon liittyy korkea kuume, ihottuma, lihaskipu. Kaikki nämä ovat merkkejä PCR: stä.
  15. Tarttuva mononukleoosi on Filatovin virustauti, joka ilmaantuu ihottumissa, sappirakossa ja ihossa, valkoisella pinnoitteella kielellä.
  16. Viruslääke A, B, C, G. Hepatiitti on helposti siirrettävissä ja vaikeasti diagnosoitu, jos et käytä tämän analyysin tekniikkaa. PCR-tulosten salaaminen auttaa havaitsemaan ongelman ulkopuolella, kun taas tartunnan saaneilla saattaa olla tavallista flunssa, päänsärky, pahoinvointi, maksan tai pernan ongelmat;
  17. HIV-infektio on vakava parantumaton immuunipuutos, joka ennen PCR-menetelmän löytämistä oli uskomattoman vaikea tunnistaa. "XX vuosisadan rutto" on edennyt nopeasti, mikäli sitä ei havaita ajoissa, eikä se käynnistä hoitoa huumeiden kanssa.

Kuten tästä luettelosta käy ilmi, PCR-diagnostiikka antaa monien rajattujen erikoisuuksien lääkäreille rajoittamattomia mahdollisuuksia. Menetelmää voidaan soveltaa pulmologiassa, virologiassa, infektiosairauksissa, onkologiassa, gastroenterologiassa, hematologiassa, gynekologiassa ja urologiassa.

PCR-transkripti: tulokset

Ketjureaktioanalyysejä arvioi vain lääkärit erikseen jokaiselle potilaalle ottaen huomioon olemassa olevat sairaudet ja krooniset sairaudet. PCR-analyysien tulokset osoittavat, kuten edellä mainittiin, patogeenisten bakteerien kvantitatiiviset ominaisuudet. Tarkastamalla heidän kanssaan lääkäri määrittää taudin vakavuuden ja vaiheen. Näiden indikaattoreiden perusteella lääkkeiden annostus ja antotavan kesto määrätään myöhemmin.

Negatiivinen PCR-tulos tarkoittaa, että kerättyyn biologiseen materiaaliin ei ole viruksia tai infektioita. Positiivinen PCR on hälytyssignaali. Siksi infektio löytyy potilaan verestä ja muista biologisista nesteistä.

Jos arvot ovat vähäiset, tämä voi viitata taudin yksinkertaiseen kantajaan eikä pelkästään taudin aktiiviseen kehitykseen. Lääkärin on jatkuvasti seurattava yksinkertainen infektionvektori, joka löytyy vain PCR: ssä, mutta ei muita oireita.

On tärkeää, ettet paniikkiin ja muista, että useimmat tunnetut virukset ovat alttiita antibioottiselle hoidolle. Valitsemalla ne ja korvaamalla toisiaan tehottomaksi, vain ammattitaitoinen asiantuntija, jolla on kokemusta tietyn sairauden hoidosta, voi.

PCR: n dekoodaus voidaan suorittaa paitsi lääkärin pyynnöstä myös omasta tahdostaan. Usein sitä tekevät naiset suunnittelevat raskautta lähiaikoina varmistaakseen, että sukupuolitauteja ei ole. Kun rekisteröidyt piirin kuulemiseen raskaana olevan naisen kanssa, tällainen diagnoosi on edelleen tarpeen.

Sääntö PCR on pakollinen niille naisille, joilla on ollut useita abortteja tai keskenmenoja eri syistä. Ennen IVF: ää tehdään analyysi, jolla poistetaan kaikki syyt sikiönmunan mahdolliseen hylkäämiseen.

Miehet pyrkivät tekemään PCR: n loman jälkeen, jonka aikana oli keinona romantiikkaa tai jopa muutama. Diagnoosi auttaa heitä vaarantamaan heidän elämäänsä ja potentiaalisten seksikumppaneidensa terveyttä.

Usein PCR tulee potilaan ainoaksi mahdollisuudeksi päästä eroon sairaudesta alkuvaiheessa, kun komplikaatioiden riski ja vakava kurssit ovat vähäpätöisiä.

Kvalitatiivinen analyysi hepatiitti C: lle

Jätä vastaus

Laadullinen analyysi polymeraasiketjureaktiosta - hepatiitti C: n PCR määrittää HCV: n läsnäolon tai puuttumisen elimistössä. Laboratoriossa tutkitaan RNA: n rakennetta, jossa virus sijaitsee. Jos virus C tunnistetaan, on välttämätöntä käydä hoitoa, koska laiminlyöty maksan toiminta aiheuttaa vakavia seurauksia. Laadullinen PCR suoritetaan talteenoton jälkeen vasta-aineiden puuttumisen varmistamiseksi. Nimetty ja ennaltaehkäisevä tutkimus. Koska veren patogeenipitoisuus on pieni, PCR (kvalitatiivinen) ei pysty havaitsemaan mitään, koska diagnoosijärjestelmällä on sen herkkyysrajat. Kun kyseessä on taudin alkuvaihe tai lievä muoto, PCR: n diagnoosiin viime kädessä ultraäänellä herkät laitteet.

Mikä on RNA-virus?

Hepatiitti C -viruksen (tai hepatiitti C -viruksen RNA) RNA-nimitystä kutsutaan itse maksasairaukseksi. Virus C sitoutuu terveen kehon soluun tunkeutumaan sisään. Ajan mittaan, levitä koko kehon, se on vain päästä veren. Tämän seurauksena taudinaiheuttaja tunkeutuu maksaan, sulaa solut ja toimii kovasti. Maksa-solut (hepatosyytit) toimivat sen vaikutuksen alaisina, muuttuvat parhaillaan ja tästä kuolevat. Mitä kauemmin virus C on maksassa, sitä enemmän soluja kuolee. Ajan myötä vaaralliset sairaudet johtavat pahanlaatuiseen rappeutumiseen ja kuolemaan.

Maksan infektiota tämäntyyppisen viruksen kanssa ei voi ilmetä millään tavoin ulkoisesti. Monien vuosien tai kymmenien vuosien ajan tartunnan saanut henkilö kokee olevansa täysin terve ja vain satunnaistarkastus paljastaa useimmiten patologian. Kun luovutetaan verta hepatiitille, tutkitaan osaa ihmisen geenistä (DNA) kuuluvasta RNA: n (ribonukleiinihappo) ketjusta. Laboratoriotutkimuksen tuloksia ei tule käyttää itsekäsittelyyn, koska tämä on vain indikaattori. Lääkäri määrittää tarkan kuvan ja lisää diagnoosia.

Kun valmis: todistus tutkimuksesta

HCV: n vahvistamiseksi on osoitettu PCR-analyysi (polymeraasiketjureaktio). PCR-tutkimukset auttavat löytämään patogeenin materiaalin RNA-rakenteessa ja määrittämään tehokkaan hoidon. Nimitetty seuraavissa tapauksissa:

  • maksa-tulehduksen merkkien tunnistaminen;
  • ennaltaehkäisyn seulontatutkimukset;
  • ihmisten kosketukseen joutuvat henkilöt;
  • eri alkuperää olevan hepatiitin diagnosointi (tärkein taudinaiheuttajan määritelmä);
  • Viruksen lisääntymisen aktiivisuuden taso kroonisessa muodossa;
  • maksakirroosi;
  • määrittää määrätyn hoidon tehokkuus.
Lääkärin määrää PCR-tutkimukset hepatiitin hoidon tehokkuuden määrittämiseksi.

PCR: n laadullinen ja kvantitatiivinen analyysi on olemassa. Kvantitatiivinen PCR osoittaa RNA: n prosenttiosuuden viruksen kantajista veressä ja kvalitatiivinen PCR osoittaa viruksen läsnäolon tai poissaolon. Laadun positiivinen indikaattori (hepatiitti C-RNA) edellyttää myös kvantitatiivista tutkimusta. Hepatiitti C: n taudinaiheuttajan korkea pitoisuus liittyy siirron riskiin, toisin sanoen muiden saastumiseen. Pieniä määriä käsitellään paremmin. RNA-virusten määrä veressä ei liity taudin voimakkuuteen. PCR-analyysi suoritetaan myös interferonihoidon yhteydessä hoitokurssin keston ja monimutkaisuuden määrittämiseksi.

Hepatiitti C: n kvalitatiivisen PCR-analyysin ominaisuudet

Kvalitatiivinen analyysi polymeraasiketjureaktioreaktiolla osoitetaan kaikille potilaille, joilla on veren vasta-aineita hepatiitti C: hen. Kuka on toipunut ja toipunut, tulisi testata uudelleen. On suositeltavaa analysoida hepatiitti B: tä, sitten positiivisen lopputuloksen tapauksessa ja hepatiitti D: n suhteen. Myös kvalitatiivisesti analysoitu reaktio on suoritettava yhdessä muiden verikokeiden kanssa. Analysoinnissa esitetään täydellinen kuva virusten leviämisestä.

Testituloksista nähdään vain positiivinen koe hepatiitti C: lle tai negatiivinen, toisin sanoen viruksen läsnäolo tai puuttuminen. Jos päätelmä on "havaittu", niin virus toimii ja toimii edelleen aktiivisesti. Nimitys "ei löydy" tarkoittaa viruksen puuttumista tai sen pienen määrän. Tämän indikaattorin avulla on otettava huomioon, että diagnoosijärjestelmien analyyttinen herkkyys on erilainen ja RNA-hepatiitti C voi olla edelleen veressä, mutta ei ilmeistä analyysissä.

Erityisen herkkä PCR-ultra-hepatiitti C -menetelmä paljastaa jopa pieninä määrinä. Käytetään hybridisaatio-fluoresoivaa tutkimusta, joka on monta kertaa suurempi kuin tavanomaiset PCR-järjestelmät. Menetelmää käytetään useissa tapauksissa:

  • hepatiitti C: n epäiltyjä piileviä muotoja;
  • Patogee- nin ei vahvistanut PCR: n diagnoosia, mutta vasta-aineita;
  • takaisin perinnässä;
  • tunnistamaan infektion varhaisessa vaiheessa.
Takaisin sisältöön

Analyysin selitys

Lopulliseen päätökseen diagnoosissa vaikuttaa HCV: n PCR-dekoodaukseen, erityisesti ultramethodin avulla. Tämän tutkimuksen tärkein haitta on se, että näytteen ja materiaalien steriilejä olosuhteita noudatetaan tiukasti. Pieni poikkeama osoittaa joskus epätarkkoja johtopäätöksiä analyytikoista, vaikeuttaa diagnoosia ja sen jälkeistä hoitoa. PCR: n analyysi hepatiittiviruksen RNA: n määrittämiseksi ei aina näytä taudin kuvaa luotettavasti, joskus epätarkkuudet hyväksytään molemmilla tavoilla.

Hepatiitti-viruksen diagnosointi on suositeltavaa soveltaa kattavaa tutkimusta.

Indikaattoreiden taso

Jagm-vasta-aineiden puuttuminen RNA: lle viruksen hepatiitti C: ssä pidetään normaalina polymeraasiketjureaktion analyysissä. Samalla serologisen analyysin tulokset osoittavat, että vasta-aineet ovat läsnä viruksessa C ja tämä on myös normin rajoissa. Kvalitatiivinen määritelmä ei osoita taudin voimakkuutta, se vain paljastaa hepatiitti C: n aiheuttavan aineen RNA: ssa. Tällainen analyysi toistetaan hoidon jälkeen todellisen elpymisen varmistamiseksi.

poikkeamat

Jos JgM-vasta-aineita HCV-RNA: lle on läsnä, tämä ilmaisee kehittyvän infektion. Tauti on akuutti tai krooninen, ilmenee eri vaiheissa. Jos vasta-aineiden määrän väheneminen kirjataan, analyysi osoittaa hoidon tulosten saavuttamisen elpymisen aikana. On erittäin harvinaisia ​​tapauksia, joissa vääriä positiivisia löydöksiä diagnosoinnissa. Ne löytyvät naisista raskauden aikana ja ihmisillä, joilla on muita tartuntatauteja.

Medinfo.club

Portaali noin maksa

PCR-analyysi HCV: lle, tyypit: negatiivinen, positiivinen ja transkriptionaalinen

PCR (polymeraasiketjureaktio) hepatiitti C: lle - määrittää syyt RNA-viruksen esiintymiseen ihmisen kehossa.

Mikä on PCR- ja RNA-veritesti?

Viruksen diagnosointi - PCR eli jopa RNA-analyysi - on hyvin nuori, toistaiseksi se on ollut jo vuosikymmenien ajan. Mutta niin lyhyen ajanjakson takia hän pystyi osoittamaan positiiviselta puoleltaan. Hepatiitti C: n PCR-analyysin tulos on monenlaisia: negatiivisia ja positiivisia. Negatiivinen - osoittaa viruksen puuttumisen veressä ja positiivinen - osoittaa hepatiitti C: n RNA: n esiintymisen veressä.

Tämän tutkimuksen veri luovutetaan laskimoon ja tyhjään vatsaan, mieluiten klo 08.00-11.00. Se testataan erittäin herkällä "Real-tima PCR" -menetelmällä - 14 IU / ml, mikä mahdollistaa tarkemman tuloksen.

PCR-määritysten tyypit ja niiden kustannukset

Hepatiitti C: n (PCR) diagnoosi on jaettu kolmeen tyyppiin:

  • laadullinen - RNA-järjestelmän käyttöaika (ketjureaktio).
  • määrällinen - viruksen kuorman määrittäminen ihmiskehoon.
  • genotyyppinen - viruksen tyypin määritelmä.

määrällinen

Määrällinen - heijastaa RNA-infektion pitoisuuden tasoa potilaan veressä. Useimmiten lääkärit määrittävät sen ennen terapeuttista hoitoa saadakseen täydellisen kuvan sairaudesta. Tiedotus lääkäreille on taudin 12. viikko. Sen avulla voit selvittää, onko hoito tehokas vai onko kyseessä jokin sairaus.

Tulokset tulkitsee lääkäri. Indeksit alkavat määritellä 8x5 IU / ml - kun kehossa on vähintään 3x6 kopiota per 1 millimetriä verta.

On hetkiä, jolloin laboratorio ei voi laskea RNA: ta, ja tulos kirjoitetaan: "mittausalueen alapuolella".

Tutkimuksen kustannukset vaihtelevat 350-5000 ruplaa. Hinta riippuu suoraan tutkimuksessa käytetyistä reagensseista.

On syytä huomata, että infektion pitoisuuden suora yhteys veressä (HCV RNA) ja sen taudin aste.

Tämä menetelmä auttaa luomaan:

  • valitun hoidon tehokkuus ja sen yksi tai muu menetelmä,
  • sairauden pituus, diagnoosi ja ennuste hoitoon ja elämään,
  • vaara, jossa potilas on taudin kantaja, esimerkiksi PA: n kanssa (seksuaalinen kanssakäyminen).

On olemassa tapauksia, joissa potilaalla on suuri infektiivinen kuormitus, mutta samanaikaisesti hänellä ei ole elintärkeän elimen soluja.

laatu

Laadullinen analyysi on seurausta taudin polymeraasiketjureaktion tutkimuksesta. Värimerkkauksen standardiarvot vaihtelevat välillä 10 - 500 IU / ml. Jos tutkimuksen jälkeen negatiivinen viruskuorma havaitaan, infektioprosentin prosenttiosuus potilaan veressä on normaalin alapuolella. Jos olet saanut tuloksen "ei löydy", kokeile 10 päivän kuluttua tutkimusta, koska jokaisella henkilöllä voi olla herkkyysraja. On tärkeää suorittaa tutkimus samassa laboratoriossa. Koska tämä riippuu myös tuloksesta.

Jos sinulla on hepatiitti C -vuoto, niin tämä analyysi näyttää "havaittu" jo 4-6 päivää infektion jälkeen. Mutta kvantitatiivisen analyysin suorittaminen - se on liian aikaista, koska voi olla väärä kielteinen tulos.

genotyypitys

Analysointi mahdollistaa melko varhaisessa vaiheessa paljastavan eräänlaisen tartunnan genotyypin potilaan veressä. Lääketieteessä tunnistettiin 11 genotyyppiä. PCR auttaa myös lääkäri vahvistaa vakautta ja kiinteyden viruksen hoitomenetelmiä, eli päättää, missä muodossa tautimutaatiosta. Kaikki tämä on välttämätöntä, jotta lääkäri voi määrätä oikean hoidon, sillä yksi genotyyppi vaatii 48 päivää hoitoa, kun taas toinen vaatii vain 20 päivää. On tapauksia, joissa laboratorio ei pysty määrittämään sairauden tyypin ja kirjoita "ei tipiruyut", eli ihmisessä on virus, joka ei vastaa esillä laboratoriossa tyypit C-hepatiitin Tässä tapauksessa on parempi uudelleen ottamaan analyysin toisessa laboratoriossa herkempiä laitteita.

jäljennös

Tutkimusten tulosten tulkitsemiseksi on parempi ottaa yhteys lääkäriisi, koska normin indikaattoreiden tuntemus tässä asiassa ei riitä. Esimerkiksi: sana "analyysi PCR hepatiitti C ei löydy" tai "löytyy / löydetty," voimme ymmärtää, mutta missä määrin on sairaus, ja minkälaista hepatiitti C, valitettavasti, ei.

Myös tulos voidaan kirjoittaa seuraavasti:

  • suoritettavan testin nimi, useimmiten he kirjoittavat: "Real-time".
  • alue, joka vahvistaa taudin läsnäolon,
  • taudin genotyyppi on 1, 2..., joka voidaan nimetä kirjaimella, esimerkiksi genotyyppi 3a.
  • veressä läsnä olevan RNA: n määrä, esimerkiksi 831,6 IU / ml.

Lääkärit kiinnittävät aina erityistä huomiota taudin viruskuorman määrittämiseen. Koska tämä indikaattori tekee tulevaisuuden ennustuksen ja auttaa määrittämään hoitomenetelmän.

Negatiivinen PCR positiivisella ELISA: lla

Joskus potilaat esittävät kysymyksen: "Onko minulla C-hepatiitti-vasta-aineita ja PCR-negatiivisia? Miksi näin on? "Tämä johtuu siitä, että analyysi suoritettiin huonosti tai tiettyjen sääntöjen noudattamatta jättämisen vuoksi. Esimerkiksi tämän menetelmän käyttö lääkkeiden diagnoosin aattona.

Tapahtuu, mutta harvoin, kun potilas saa virheellisen tuloksen. Tämä johtuu joidenkin sääntöjen noudattamatta jättämisestä potilaan tai laboratorion kanssa. Sama tapahtuu myös silloin, kun analyysi PTSR negatiiviseksi ja IFA positiiviseksi. Tämä osoittaa, että HCV: tä ei löydy potilaan verestä, mutta ennen sitä virus oli akuutissa muodossa kehossa. Mutta tämä tapahtuu harvemmin. Erityisesti tuloksia tulkittaessa lääkärit ohjataan PCR-indikaattorilla.

Analyysimenetelmät ja niiden tekeminen

Jos sinulla on epäillään esiintyvän kehossa sairauden "hepatiitti C" - tutustu artikkeli siitä, miten hepatiitti C. Jos haluat tarkistaa tosiasia infektion läsnäolon, tai tarkistaa tehokkuutta tämän sairauden hoitoon, on välttämätöntä suorittamaan laadullisen ja määrällisen analyysin. Heidän ansiostaan ​​lääkärit voivat tarkasti määrittää potilaan terveydentilaa koskevien toimenpiteidensa oikeellisuuden.

Analyysi PCR: stä voidaan tehdä missä tahansa laboratoriossa ilmaiseksi ja maksettuina. Tärkeintä on, jos se on tarpeen toteuttaa toinen tutkimus ei liity väärien negatiivisten tulosten, se on parasta testataan samassa laboratoriossa, koska kukin asettaa sen areenoina, joka voi sekoittaa lääkäri. Tämä puolestaan ​​voi johtaa virheellisen hoitomenetelmän määrään ja elpymisen keston nostamiseen.

PCR-diagnostiikka: mitä biomateriaalit ja valmisteet perustuvat, miten he tekevät, mistä sairauksista se sopii?

PCR (polymeraasiketjureaktio) - molekyylibiologian, joka on yksi kliinisen laboratoriotutkimuksen tärkeimmistä menetelmiä 20-luvun lopulla ja 2100-luvun alussa, mikä on erittäin hyödyllistä lääketieteen eri aloilla.

Monet ihmiset sekoittavat sen ELISA (entsyymi immunoassay) kanssa, joka yleensä on ymmärrettävää. Ne ovat jossain määrin samankaltaisia, koska he suorittavat yhden tehtävän - etsimään patologisten tilojen syy, joka johtuu infektoivien aineiden tunkeutumisesta ihmiskehoon. Kuitenkin niiden välillä on eroja. Esimerkiksi ELISA etsii jälkiä mikro-organismeista, toisin sanoen vasta-aineista (AT) ja PCR löytää patogeenin "pyhän piilot" - DNA: n tai RNA: n (nukleiinihapot), antaen elämästä vieraita ihmiskehon mikroskooppisille olentoille.

PCR-menetelmillä on käytettävissä "vihollisen" nukleiinihapot, joita esiintyy kaikissa biologisissa nesteissä ja kehon kudoksissa, Tämä analyysi ei velvoita sinua käyttämään vain laskimonsisäistä verta, voit ottaa sylkeä, purkaa sukupuolielimeltä, ysköstä tai muusta ympäristöstä, joka kantaa tietoja taudista. Tutkimusaineiston valinta on edelleen lääkäri, joka määrittelee tämän tai patologian ja tietää, mikä väline on tällaisissa tapauksissa informatiivisempi.

Mikä on polymeraasiketjureaktion ydin?

PCR-tutkimus on molekyylibiologian saavutus ja suuri saavutus. Tämä on menetelmä, joka havaitsee ulkomaalaisen geneettisen materiaalin (genomin) DNA: n tai RNA: n mikro-alueet tunnistaen vain yhden mikro-organismin ominaispiirteet sekoittamatta sitä mihinkään muuhun. Miten PCR-menetelmä toimii ja miten hän pystyy palauttamaan kuvan infektiivisen solun käyttäytymisestä elävässä elimistössä?

PCR-prosessi

Niinpä löytyy nukleiinihapon fragmentti, mutta se on yksi ja reaktiolle ei selvästikään riitä, joten se koodataan (kopioidaan). Lisäprosessille tarvitaan kuitenkin suuri määrä tällaisia ​​mikroalueita, jotka voivat varmistaa sen lisääntymisen täydentämällä uusia DNA-segmenttejä (replikaatiota), jotka ovat identtisiä löydetyn fragmentin kanssa. Kopiointi on nukleiinihapon luonnollinen ja olennainen ominaisuus, joka replikoituu entsyymipolymeraasilla jopa elävän organismin ulkopuolella (koeputkessa, jossa on hajoaminen) muodostaen paljon klooneja eli se menee ketjureaktio. Kloonit ovat yhä enemmän uusia fragmentteja, mutta vain ne, joissa tutkija on kiinnostunut. Siksi on tärkeää ottaa "puhdas", ilman vieraiden aineiden analyysiä, ja koe suorittaa erittäin huolellisesti.

Ottaen huomioon polymeraasiketjureaktion luetellut ominaisuudet, voit arvata, miksi se erottaa helposti ureaplasman mykoplasmasta tai kumpaan niistä klamydiasta.

Niinpä vaikka miljoonat ihmiskehon soluista eksyä ole eläviä viruksia, mutta vain hieman hänen DNA, PCR jos se ei estä ehkä selviytymään tehtävästä ja raportoida läsnäolo "ulkopuolisten" positiivisen tuloksen. Tämä on PCR: n ydin ja sen tärkein etu.

Edut ja haitat

PCR-diagnoosin suorittavalla laboratoriolla on korkeimmat vaatimukset laitteiden, testausjärjestelmien ja lääketieteellisen henkilöstön pätevyydestä. Tämä on korkean teknologian laboratorio, jolla on erittäin arkaluonteisia ja hyvin erityisiä reagensseja, joten sillä ei ole erityisiä haittoja. Ellei se anna positiivista tulosta kliinisten ilmiöiden puuttuessa ja siten asettaa klinikan dilemman eteen: onko syytä aloittaa hoito vai ei?

Potilaan tarkkaava lääkäri epäilee testitulosten luotettavuutta, koska hän ei näe mitään taudin oireita. Mutta silti, koska PCR-järjestelmän korkea herkkyys on muistettava, että se havaitsee taudinaiheuttajan myös prekliinisessä vaiheessa, ja positiivinen tulos tässä tapauksessa on enemmän etua kuin haitta. Tästä eteenpäin hoitavan lääkärin on itse päätettävä hoidon tarkoituksenmukaisuudesta, ottaen huomioon muut argumentit "for" ja "against".

Diagnostiikan edut polymeraasiketjureaktion avulla ovat ilmeisiä:

  • Korkea spesifisyys, saavuttaa 100% sen vuoksi, että läsnäolo tietyllä näytteellä on tiettyyn organismiin liittyvien nukleiinihapposeosten hiukkasia, mutta vieraita ihmisille;
  • Korkea suorituskyky, koska PCR on korkean teknologian automatisoitu tekniikka, joka mahdollistaa testauksen aineen ottamisen päivänä ja siten potilas päästää tarpeettomilta huolenaiheilta;
  • PCR, joka työskentelee yhdessä näytteessä, pystyy tekemään useita tutkimuksia jahavaitsemaan useita taudinaiheuttajia, jos hänellä on tällainen tehtävä. Esimerkiksi klamydiaalisen infektion diagnosoinnissa, jossa PCR viittaa pääasiallisiin menetelmiin, klamydian ohella on mahdollista havaita gonorrean aiheuttavan neisseria (gonococcus). Lisäksi tulosten luotettavuutta ei heijastu kielteisesti;
  • PCR testaa sinuaon vaarallisia mikro-organismeja inkubaatiokaudella, kun he eivät ole vielä onnistuneet aiheuttamaan merkittävää haittaa elimelle, eli varhaisen diagnoosin varoittaa patologisen prosessin tulevaa kehitystä, mikä mahdollistaa sen valmistautumisen ja sen valmistamisen täysin.

Lisäksi, jotta vältetään väärinkäsitykset, mikä johtaa toisinaan diagnoosin, PCR suojelee itseään se, että sen tuloksia voidaan kiinnittää (valokuvaus, tietokone), jotta käyttää niitä, jotta asiantuntija, jos se on tarpeen.

PCR: n vastausten normaaliarvo on negatiivinen, mikä viittaa vieraiden nukleiinihappojen fragmenttien puuttumiseen, positiivinen vaste osoittaa infektion esiintymisen elimistössä, numeeriset arvot tarkoittavat viruksen tilaa ja sen pitoisuutta testin aikana. Kuitenkin analyysin täydellinen transkripti on tehty lääkäriltä, ​​jolle on tehty erityinen tutkimus aiheesta "PCR". Tulosten tulkitseminen itse ei ole järkevää, koska on todennäköistä, että se todennäköisesti tapahtuu, väärin ymmärtää ja alkaa huolestuttaa etukäteen.

Mikä on "pelkää" PCR: stä, mitä se tietää ja miten valmistautua siihen?

Kuten muissakin tutkimuksissa, joskus testitulokset ovat vääriä positiivisia tai vääriä negatiivisia, jossa PCR ei ole poikkeus. Tämä voi tapahtua seuraavissa tapauksissa:

  1. Prosessin hajoaminen jossakin vaiheessa reaktiosta;
  2. Aineiston keräämistä, varastointia tai kuljettamista koskevien sääntöjen noudattamatta jättäminen;
  3. Ulkomaisten epäpuhtauksien esiintyminen materiaalissa.

Tämä viittaa siihen, että infektioiden PCR - diagnoosia tulisi lähestyä huolellisesti, huolellisesti ja huolellisesti, muutoin materiaalin näytteet saattavat muuttaa rakenteensa tai jopa romahtaa.

PCR-diagnostiikan vaiheet. Väärennetyt tulokset voivat antaa rikkomuksia missä tahansa tutkimuksen vaiheessa

PCR-infektion diagnosoimiseksi on luokiteltu "kultaisena standardina" muun laboratoriomenetelmiä, joten sitä voidaan käyttää etsiä tekijöille monia sairauksia, ensi silmäyksellä ei ole mitään tekemistä toistensa kanssa:

  • Eri lokalisoitumisen tuberkuloosi, keuhkokuume (mukaan lukien epileptinen, klamydian aiheuttama);
  • Lasten infektiot (tuhkarokko, rupla, parotitis, tuhkarokko);
  • kurkkumätä;
  • salmonelloosiin;
  • Zoonoottinen tarttuva tauti - listeriosis (sairaus on ominaista erilaisilla oireilla, joihin liittyy imusolmukkeet, keskushermosto, sisäelimet);
  • Epstein-Barr-viruksen tunkeutumisen aiheuttamat sairaudet (tarttuva mononukleoosi jne.);
  • Onkologinen patologia, jonka aiheutti papilloomovirusinfektio (HPV ja sen tyypit);
  • Borrelioosi (Lyme-tauti, rypälepuhallettu enkefaliitti);
  • Helicobacter pylori -infektio, joka johtuu Helicobacter pylori -bakteerista, joka elää ihmisen vatsaan. On osoitettu, että Helicobacter aiheuttaa mahalaukun tai pohjukaissuolen syövän kehittymistä.
  • Kandidaasi ja lähes kaikki sukupuolitaudit.

PCR diagnoosi infektioita, sukupuolitauteja, on erityisen merkittävä, koska niiden aiheuttamien sairauksien, usein pitkään suoritetaan ilman mitään kliinisiä ilmenemismuotoja, mutta raskauden aikana ovat yhä aktiivisia, ja näin uhata terveyttä ja jopa lapsen elämää. Samoin käyttäytyvät ja TORCH-infektiot. Jotkut niistä ("taskulamppu") liittyvät samanaikaisesti STI: eihin, joten jälkimmäiset vaativat tarkempaa tarkastelua. Lukija osaa tutustua suosituimpiin menetelmiin artikkelin seuraavissa osissa.

Kuinka valmistautua luotettavan tuloksen saamiseen?

Heti huomaamme, että PTSR: n valmistelu on yksinkertaista, potilaalle mahdollisesti aiheutuvia erityisiä ponnisteluja. Tarvitaan vain kolme yksinkertaista tehtävää:

  1. Sinulla ei ole sukupuoliyhteyttä 24 tuntia ennen testiä;
  2. Veden veren keräämistä ja analysointia varten sinun on mentävä tyhjään vatsaan, ja muuten et voi juoda;
  3. Virtsan luovuttaminen seuraa yötä (aamulla - steriilillä purkkivoimalla, osti päivä ennen apteekissa).

PCR voi toimia missä tahansa biologisessa ympäristössä

PCR-menetelmä ei ole "verenhimoinen", joten se hyväksyy minkä tahansa biologisen väliaineen, joka sisältää oletetun infektiivisen aineen. valinta - mitä sinun tarvitsee tehdä tutkimukseen, se pysyy lääkärille.

Näin ollen, kun etsit muuta ainetta kuin verikokeen (vaikka se sopii myös ja useimmissa tapauksissa otetaan rinnakkain toisen aineen kanssa), voit käyttää:

  • Smear (urogenitaalisen solun erittyminen);
  • Soskobin limakalvot suuontelon, sidekalvon, nenänielun, sukupuolielimistön (naisista, jotka on otettu kohdunkaulasta ja emättimestä, miehillä - virtsaputkesta);
  • sylki;
  • sperma;
  • Eturauhasen mehu;
  • Istukan kudokset ja lapsivesi (amniootti);
  • Virtsan sedimentti (sentrifugoinnin jälkeen) esimerkiksi tiettyjen STI: iden ja mykobakteerien tuberkuloosin tunnistamiseksi;
  • Ehtymää ja pleuraalista nestettä samaan tarkoitukseen;
  • eritteitä;
  • Cerebrospinaalinen neste, kun epäillään CNS-tartuntataudista;
  • Biopsian materiaali (biopsia), joka on peräisin maksasta, 12 pohjukaissuolesta, mahasta jne.

Edellä mainittujen Haluan lisätä, että testattava aines kaikissa tapauksissa, myös naarmuja ja päästöt on tarpeeksi, koska testaus PCR suuria määriä ei edellytä analysointia puuttuu ja muutaman mikrolitraa, jotka on tyypillisesti otettu vuonna mikroputkisaksien tyyppi "Eppendorf" ja lähetetään tutkimus.

Taudit ja PCR: n käyttö

HIV- ja polymeraasiketjureaktio

Yleensä, kun anonyymitutkimus suoritetaan positiivisten immunoblot-tulosten tapauksessa, HIV-infektion diagnoosi toistetaan uudestaan. Jos diagnoosi on vahvistettu, potilaalle annetaan lisätutkimuksia:

  1. CD-lymfosyyttien lukumäärän absoluuttisten arvojen immunologisten reaktioiden määrittäminen4 (immunokompetentit solut - T-avustajat tai avustajat), jotka infektoivat infektion ensiksi, minkä jälkeen he menettävät perusominaisuutensa eivätkä voi erottaa toisistaan ​​"omia" ja toisia. " Viruksen verta-RNA: n plasman kiertäessä ne otetaan normaalille kehon soluille eivätkä reagoi niiden suhteen;
  2. Virus-RNA: n havaitseminen PCR-menetelmällä ja viruspartikkelien pitoisuuden laskeminen vaiheen, patologisen prosessin vakavuuden ja ennusteiden perusteella ottaen huomioon nämä tiedot. Tietenkään tässä suunnitelmassa ei ole sanaa "normia", koska reaktio on aina positiivinen ja digitaalisten arvojen tulkinta kuuluu lääkärin toimivaltaan.

PCR ja hepatiitti

PCR-menetelmällä voidaan tunnistaa hepatiittipatogeenejä, useimmiten testiä käytetään hepatiitin C diagnosointiin, mikä on huonosti määritelty muilla menetelmillä.

Hepatiitti C -virus (RNA: ta sisältävä) muistuttaa HIV: tä sen käyttäytymisestä ihmiskehossa. Kiilaamalla genomiin maksasolut (hepatosyytit), se pysyy siellä, odottamassa, joka voi ilmetä jo 2 vuoden kuluttua, vähintään 20 vuotta, niin lääkärit kutsuivat häntä "lempeä tappaja". Hepatiitti C johtaa pahanlaatuisen prosessin muodostumiseen maksan parenkyymissä, joka ilmenee loppuvaiheessa. Kaikki nämä tapahtumat immuunijärjestelmä ei huomaa, ottaen virus hepatosyytti. Todellakin, viruksen vasta-aineita joissakin määrissä tuotetaan, mutta ne eivät tarjoa kunnollista immuunivastetta. ELISA diagnoosi hepatiitti C ei ole kovin informatiivinen, koska se osoittaa, että virus on jättänyt jälkiä, kuin jos hän olisi mennyt - ei tunneta. HCV: n avulla tunnetaan itsensä paranemistapaukset, kun taas virusvasta-aineet pysyvät ja jatkuvat elinaikana (immunologinen muisti). PCR on selvästi edellä vasta-aineiden muodostumisen ja voi havaita viruspartikkelin jälkeen 1-+1,5viikkoa, kun taas AT voi esiintyä alueella 2 kuusi kuukautta

PCR-diagnostiikka, jos epäillään virtsarakon virusta Hepatiitti C ihmiskehossa on optimaalinen tutkimusmenetelmä, koska se pystyy vain tunnistamaan "rakastavan vihollisen" läsnäolon veren tai maksan biopsiapotilaassa.

Kuitenkin joskus on tapauksia, joissa AT: t ovat positiivisia ja PCR-tulos on negatiivinen. Tämä tapahtuu joskus hyvin pienellä määrällä virusta tai kun se on "lepotilassa" maksassa poistumatta verenkiertoon. Totuuden löytämiseksi potilas analysoidaan uudelleen ja joskus ei yksin.

Papillomovirusinfektio

HPV (ihmisen papilloomavirus), ellei ole itsekorjautumiskokeille, se voi myös, ei todista sinänsä pitkään säilyä isännässä, joka ei edes tiedä sitä, koska ei ollut mahdollista tehdä PCR ja oireet olivat poissa. Sen, että tartunnan papillomovirusnoy, vaikka piilevä, ei välinpitämätön ihmisten terveydelle missä erityistä vaaraa ovat tietyntyyppisiä virus, joka aiheuttaa syöpää (16, 18).

HPV usein kärsii naisten puolet väestöstä, koska virus rakastaa naisen sukuelimiin, ja erityisesti - kohdunkaula, jossa joidenkin virusten edistää kehitystä dysplastic prosessien ja sitten kohdunkaulansyöpä hoitamattomana dysplasiaa ja vapauttaa virus. Niin, polymeraasiketjureaktiota havaita virus-DNA, ja ilmoittaa sitten "huono" tai "hyvä" (onkogeeninen tai ei-onkogeenisen) tyypin asettui naisen elimistöön.

Muut STI- ja TORCH-infektiot

On selvää, että polymeraasiketjureaktio voi löytää minkä tahansa ulkoisen rakenteen, joka koostuu nukleiinihapoista, joten tämä testi sopii kaikkien STD- ja TORCH-infektioiden havaitsemiseen, mutta sitä ei aina käytetä. Miksi esimerkiksi tehdä tällaisia ​​kalliita tutkimuksia Trichomonas tai gonorrhea, jos on edullisempaa ja halpaa?

TORCH-infektiot ja STI-yhdisteet ovat niin yhteenliittyneitä, että toisinaan on vaikea määrittää, mikä ryhmä on syytä kohdistaa yhteen tai muuhun aiheuttajaan. Ne yleensä voi olla vaikea ymmärtää, koska se on melko monipuolinen joukko mikro-organismeja, jotka voivat tarttua seksuaalisesti on aina vai vain tietyissä olosuhteissa (immuunipuutos), ja se voi olla kiinnostava vain raskauden aikana, koska mahdollisia kielteisiä vaikutuksia kurssin ja sikiöön.

PCR on tärkein keino piilotettujen infektioiden havaitsemiseen

Kliinisten ilmentymien kehityksen ytimessä ovat erilaiset taudinaiheuttajat, joita voidaan löytää vain PCR: n kautta, mikä on sen pääasiallinen tehtävä joskus ELISA: n yhteydessä ja joskus koska se on ainoa vahvistava testi, varsinkin jos taudin oireyhtymä puuttuu. Tällainen vaikea tilanne voi luoda polymikrobisen infektion, joka eksplisiittisten patogeenien lisäksi sisältää opportunistisia patogeenejä.

Esimerkiksi sukupuolielinten tulehdussairauksista kärsivillä miehillä havaitaan usein urethritsiä, klamydiaa, ureaplasmaa ja mykoplasmaa. Nämä ovat samanlaisia ​​vaaran ja naisvartaloa. Ne, jotka tuntevat petollisuus klamydian ja kohtasi, muistaa kuinka vaikeaa on löytää ja tunnistaa, niin analyysin tuottama PCR klamydian, varsinkin luotettu, kun piilossa solussa on hyvin pieni kooltaan loinen käyttäytyy hellävaraisesti ja aiheutunutta vahinkoa aina salaa.

Ureaplasmaa hoidetaan usein mykoplasman yhteydessä. Ja se ei ole sattumaa. Nämä lajit, kuten klamydia, eivät viittaa viruksiin eikä bakteereihin, ne elävät soluissa ja kuuluvat STI-yhdisteisiin, vaikka niiden esiintyminen terveessä kehossa ei ole harvinaista. Joten erottaakseen terveen kantajan sairaudesta, tarvitaan erityisiä menetelmiä, joissa PCR: n katsotaan olevan luotettavin, koska näiden mikro-organismien rakenteen ja käyttäytymisen erityispiirteet huomioon ottaen muut tutkimukset osoittautuvat tehottomiksi.

Mitä tulee herpesvirukseen (tyyppi 1, 2) ja sytomegalovirukseen, joka kuuluu myös herpesvirukseen (tyyppi 5), tilanne tässä on myös epäselvä. Infektio maailman väestöstä on lähes 100%, joten tässä tapauksessa on erittäin tärkeää tunnistaa viruksen ja sen annoksen, joka on erityisen tärkeä merkitys raskauden aikuisena, virus on juurtunut ruumiin, eivät useinkaan aiheuta ongelmia ja sairauden merkkejä ei.

Siksi ei pidä sivuuttaa lääkärin määräyksestä kuin kyselyn, koska joissakin tapauksissa polymeraasiketjureaktiota on oltava ja tarpeellinen tapa Laboratoriodiagnostiikan, jotka voivat suojautua vakavia komplikaatioita, ei vain naisia, vaan myös nuoret, syntymätön, ihminen.

Lopuksi haluan todeta, että tällainen hieno menetelmä, kuten PCR on palvellut ihmiskuntaa yli 30 vuoden ajan. Samalla testin tehtävät eivät rajoitu vain tartuntatautien etsintään. Molekyylibiologian perusteella syntynyt polymeraasiketjureaktio liittyy erottamattomasti genetiikkaan, se on käytetään onnistuneesti kriminologiassa identiteetin tunnistamisessa, oikeuslääketieteessä isyysasutuksen, eläinlääketieteen, jos eläin klinikalla on mahdollisuus ostaa kalliita laitteita sekä muilla aloilla (teollisuus, maatalous, jne.).


Edellinen Artikkeli

Viruksen hepatiitti C

Seuraava Artikkeli

Lopeta hepatiitti C

Aiheeseen Liittyviä Artikkeleita Hepatiitti